mikrodysekcja laserowa: potężne narzędzie do genomiki na poziomie komórek

mikrodysekcja laserowa (lm) stała się szeroko zdemokratyzowana w ciągu ostatnich piętnastu lat. Instrumenty ewoluowały, aby oferować mocniejsze i wydajniejsze lasery, a także nowe opcje pobierania i przygotowania próbek. Ewolucje technologiczne skupiły się również na możliwościach analizy po mikrodissekcji, otwierając badania we wszystkich dyscyplinach Biologii Doświadczalnej i klinicznej, dzięki pojawieniu się nowych wysokowydajnych metod analizy genomu, w tym RNAseq i proteomiki, obecnie znanej na całym świecie jako mikrogenomika, tj. analiza biomolekuł na poziomie komórki. Pomimo postępów tych szybko rozwijających się metod pozwoliły, przepływ pracy do pobierania i pobierania próbek przez lm pozostaje krytycznym krokiem w zapewnieniu integralności próbki w zakresie histologii (dokładna identyfikacja komórek) i biochemii (wiarygodne analizy biomolekuł). W tym przeglądzie opisujemy przetwarzanie próbki, a także mocne i ograniczające czynniki lm stosowane do specyficznej selekcji jednej lub więcej interesujących komórek z niejednorodnej tkanki. Zobaczymy, w jaki sposób najnowsze osiągnięcia w protokołach i metodach uczyniły z LM potężne i czasami niezbędne narzędzie do analizy genomicznej i proteomicznej niewielkich ilości biomolekuł wyekstrahowanych z kilku komórek wyizolowanych ze złożonej tkanki, w ich fizjologicznym kontekście, oferując w ten sposób nowe możliwości zrozumienia podstawowych procesów fizjologicznych i / lub Pato-fizjologicznych.