ALLES ÜBER HUVEC: 6 Fragen und Antworten

Primär
Mensch
Nabelschnur
Vene
Endothel
Zellen
(HUVEC) werden aus der Nabelschnurvene isoliert und häufig für physiologische und pharmakologische Untersuchungen wie Makromolekültransport, Blutgerinnung, Angiogenese und Fibrinolyse verwendet.

• 1. Wie kann ich HUVEC ohne Antibiotika erfolgreich aus Nabelschnüren isolieren?
• 2. Was ist der Unterschied zwischen PromoCell HUVECs und HUV-EC-C von ATCC?
• 3. Welche Art von Endothelzellen eignet sich am besten für die Untersuchung der Angiogenese?
• 4. Wie viele Passagen kann ich mit PromoCell HUVECs durchführen?
• 5. Stammen PromoCell-Zellen von Einzelspendern oder werden sie von mehreren Spendern gepoolt? Was ist der Unterschied zwischen ihnen?
• 6. Welches Medium empfiehlt PromoCell für HUVEC – Endothelial Cell Growth Medium oder Endothelial Cell Growth Medium 2?

Wie kann ich HUVEC ohne Antibiotika erfolgreich aus Nabelschnüren isolieren?

Bei PromoCell beziehen wir die Nabelschnüre von unseren Gewebelieferanten ohne Zugabe von Puffern oder Medien. Diese Methode verhindert, dass die Mikroorganismen in die Blutgefäße gespült werden. Bevor wir mit der Zellpräparation beginnen, wird auch die Nabelschnur an beiden Enden mit einem sterilen Skalpell durchtrennt, um neben dem sterilen Lumen sterile Schnittpunkte zu schaffen.
Diese Methode erlaubt es uns, sterile Endothelzellen aus der Nabelvene zu isolieren und in antibiotikafreien Kulturmedien zu plazieren.

Was ist der Unterschied zwischen PromoCell HUVECs und HUV-EC-C von ATCC?

PromoCell HUVECs werden frisch aus Nabelschnurvenen isoliert. Sie werden am Ende der Primärkultur kryokonserviert. Nach der Wiederbelebung können sie für > 15 Verdopplungen vermehrt werden und werden schließlich seneszieren.
HUV-EC-C von ATCC ist eine hypodiploide humane Zelllinie endothelialen Ursprungs (Nabelvene). Die modale Chromosomenzahl beträgt 45 und tritt in 72% der gezählten Zellen auf. Die Rate der polyploiden Zellen beträgt 15,8%. Die Zellen haben eine Lebenserwartung von 50 bis 60 Populationsverdopplungen. Dies zeigt an, dass die Zellen keine „normalen Zellen“ mehr sind, sondern einen gewissen Grad an Transformation durchlaufen haben.

Welche Art von Endothelzellen eignet sich am besten für die Untersuchung der Angiogenese?

Die Untersuchung der Angiogenese wurde durch die Fähigkeit, Endothelzellen in vitro zu kultivieren, signifikant vorangetrieben. Anfänglich wurden große Gefäß-ECs, wie sie aus der menschlichen Nabelvene (HUVEC) isoliert wurden, für diese Studien verwendet, aber zunehmend wurde erkannt, dass mikrovaskuläre Endothelzellen ein geeigneteres Modell sind, da die Angiogenese eher Mikrogefäße als große Gefäß-ECs umfasst.

Wie viele Passagen kann ich mit PromoCell HUVECs durchführen?

PromoCell Garantie > 15 PD für ihre HUVEC. Die Anzahl der Passagen, die durchgeführt werden können, hängt vom Verdünnungsfaktor ab, der während der Subkultur verwendet wird. Wenn Sie die Zellen 1: 4 teilen, können sie etwa 2 Populationsverdopplungen pro Passage durchführen, was bedeutet, dass sie für mindestens 6-8 Passagen kultiviert werden können.

Stammen PromoCell-Zellen von Einzelspendern oder werden sie von mehreren Spendern gepoolt? Was ist der Unterschied zwischen ihnen?

PromoCell Humane Zellen stammen im Allgemeinen von Einzelspendern ab. Alter, Geschlecht und Rasse des Spenders sind im chargenspezifischen Analysenzertifikat angegeben, das von unserer Website heruntergeladen werden kann.

Unsere HUVEC-Einzelspender (C-12200) werden aus einer einzigen Nabelschnur isoliert, in Primärkultur vermehrt und bei Subkonfluenz eingefroren.
Zur Herstellung von HUVEC-pooled (C12203) isolieren wir gleichzeitig die Zellen aus 2-4 Nabelschnüren und züchten sie in separaten Gewebekulturschalen. Die Zellen werden nach der Trypsinisierung gepoolt, da ihre Wachstumsraten vergleichbar sind.

Welches Medium empfiehlt PromoCell für HUVEC – Endothelial Cell Growth Medium oder Endothelial Cell Growth Medium 2?

Das Standardmedium für die Isolierung und Vermehrung unserer HUVEC, HUAEC, HPAEC und HSaVEC ist Endothelzellwachstumsmedium (C-22010). Es enthält ECGS, einen Extrakt aus dem bovinen Hypothalamus, der mitogene Wirkungen auf die Proliferation von Endothelzellen hat.
Wissenschaftler, die ein definierteres Wachstumsmedium bevorzugen, können Endothelzellwachstumsmedium 2 (C-22011) verwenden. In diesem Medium wird ECGS durch VEGF, IGF und zusätzliches bFGF und EGF ersetzt, um das Wachstum von Endothelzellen zu stimulieren.

NOCH FRAGEN?

Wenn Sie Fragen zur Funktionsweise dieser Technologie haben oder Hilfe bei der Einrichtung Ihres Assays benötigen, hilft Ihnen unser erfahrenes technisches Support-Team (alle sind PhD) gerne per E-Mail [email protected] ), Telefon (+34.934464700) oder wir können Sie besuchen. Lass uns reden!

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