Concanavaline A (Con A), Biotinylée

À pH neutre et alcalin, Con A existe sous la forme d’un tétramère de quatre sous-unités identiques ; en dessous de pH 5,6, Con A se dissocie en dimères actifs de 52 kDa. L’acétylation, la succinylation ou d’autres dérivatisations peuvent également produire des formes stables avec des structures dimériques. (Voir Con A succinylé). Les entailles de la séquence sont souvent présentes dans les préparations les plus pures en raison de dommages hydrolytiques dans les graines.
Con A nécessite des ions calcium ou manganèse à chacun de ses quatre sites de liaison aux saccharides. Bien que ces ions métalliques divalents soient étroitement liés à la structure polypeptidique, les tampons qui peuvent lier le calcium (comme le phosphate) doivent généralement être évités lors de la dilution du Con A, car une perte progressive d’activité peut se produire.
Cette lectine biotinylée est un intermédiaire idéal pour l’examen des glycoconjugués à l’aide du système Biotine-Avidine/Streptavidine. La lectine biotinylée est d’abord ajoutée, suivie du réactif VECTASTAIN® ABC, du conjugué Avidine D ou du dérivé de streptavidine.
Sucre inhibiteur /éluant: mélange d’α-méthylmannoside de 200 mM / α-méthylglucoside de 200 mm