Laser microdissection: een krachtig hulpmiddel voor genomica op celniveau

Laser microdissection (LM) is de laatste vijftien jaar op grote schaal gedemocratiseerd. Instrumenten zijn geëvolueerd om krachtigere en efficiëntere lasers te bieden, evenals nieuwe opties voor monsterverzameling en-voorbereiding. De technologische evoluties hebben zich ook op de mogelijkheden van de post-microdissectionanalyse geconcentreerd, die onderzoeken in alle disciplines van experimentele en Klinische biologie openen, dankzij de komst van nieuwe hoog-productiemethodes van genoomanalyse, met inbegrip van RNAseq en proteomics, nu globaal als microgenomics, d.w.z. analyse van biomoleculen op celniveau wordt bekend. Ondanks de vooruitgang die deze snel ontwikkelende methoden hebben toegestaan, blijft de workflow voor bemonstering en inzameling door LM een kritieke stap in het verzekeren van steekproefintegriteit in termen van histologie (nauwkeurige celidentificatie) en biochemie (betrouwbare analyses van biomoleculen). In dit overzicht beschrijven we zowel de monsterverwerking als de sterktes en beperkende factoren van LM toegepast op de specifieke selectie van een of meer cellen van belang uit een heterogeen Weefsel. We zullen zien hoe de laatste ontwikkelingen in protocollen en methoden LM hebben gemaakt tot een krachtige en soms essentiële tool voor genomische en proteomische analyses van kleine hoeveelheden biomoleculen geëxtraheerd uit enkele cellen geïsoleerd uit een complex weefsel, in hun fysiologische context, waardoor nieuwe mogelijkheden voor het begrijpen van fundamentele fysiologische en/of patho-fysiologische processen.