Concanavalina A (Con A), biotinilata

A pH neutro e alcalino, Con A esiste come tetramero di quattro subunità identiche; al di sotto di pH 5,6, Con A si dissocia in dimeri attivi di 52 kDa. L’acetilazione, la succinilazione o altre derivazioni possono anche produrre forme stabili con strutture dimeriche. (Vedi succinylated Con A). I nick nella sequenza sono spesso presenti nelle preparazioni più pure a causa del danno idrolitico all’interno dei semi.
Con A richiede ioni di calcio o manganese in ciascuno dei suoi quattro siti di legame del saccaride. Sebbene questi ioni metallici bivalenti siano strettamente legati alla struttura polipeptidica, i tamponi che possono legare il calcio (come il fosfato) in genere dovrebbero essere evitati nel diluire Con A, poiché può verificarsi una graduale perdita di attività.
Questa lectina biotinilata è un intermedio ideale per l’esame dei glicoconiugati utilizzando il sistema Biotina-avidina/streptavidina. Prima viene aggiunta la lectina biotinilata, seguita dal reagente VECTASTAIN ® ABC, dal coniugato Avidina D o dal derivato streptavidina.
Zucchero inibente / eluente: miscela di 200 mm α-metilmannoside / 200 mm α-metilglucoside