90 년대 초부터 효모 2 하이브리드 시스템의 개발 및 점진적인 개선은 단백질 상호 작용을 탐지 할 수있는 방식에 혁명을 일으켰습니다 1.
효모 2 하이브리드는 관심있는 두 단백질 또는 폴리펩티드가 상호 작용할 때 기능성 전사 인자의 재구성에 기초한다. 이것은 취재원 유전자의 녹음방송이 특정한 표현형,선택적인 매체에 보통 성장 또는 효모 식민지의 색깔에 있는 변화로 이끌어 내는 유전자 변형된 효모 긴장에서 일어납니다. 가장 인기있는 리포터 유전자는 히스티딘이 부족한 배지에서 효모를 선택하고 비색 분석에서 효모를 스크리닝하는 것입니다.
효모 2 하이브리드 분석의 기술적 세부 사항은 아래 만화에 설명되어 있습니다.
2 개의 융합(‘잡종’)은 관심 있는 각 단백질과 티에프핀의 활성화 도메인(티에프핀의 활성화 도메인)사이에 구성된다. 이 단백질은”미끼”라고하며,단백질은”먹이”로 광고에 융합됩니다.
에 따라 사이의 상호 작용 미끼를 먹이,DBD 및 광고에서 가져온 가까이하고 기능적 TF 재구성의 상류 기자는 유전자입니다. 가장 인기있는 융합은 효모 및 효모를 사용합니다. 박테리아 단백질 렉사 또한 자주 사용됩니다.
유전자 기술로서,효모 2 하이브리드 스크린은 두 개의 표적 단백질 사이의 직접적인 상호 작용을 테스트하거나 원하는 세포 유형,조직 또는 전체 유기체로부터 제조 된 단백질 단편의 라이브러리를 스크리닝하는 미끼로 좋아하는 단백질을 사용하기 위해 민감하고 비용 효율적인 평균을 제공합니다. 상호 작용 파트너의 정체성은 다음 선택한 효 모 식민지에서 해당 플라스 미드를 시퀀싱 하 여 얻을 수 있습니다. 전체 길이 단백질 모음(‘또는’)은 여러 종에 사용할 수 있지만 아직 전체 프로테옴을 덮지는 않습니다.
효모 2-하이브리드 시스템은 과학계에 의해 빠르게 채택되었으며 다양한 종 및 연구 분야의 스크린은 이미 수십 수천 개의 출판물로 이어졌습니다. 그것은 새로운 단백질 상호 작용을 발견 할 때 최근에 출판 된 문헌에 반영된 바와 같이 선택의 방법으로 남아 있습니다.
코 팩터,또는 단백질 파트너 2 의 주어진 번역 후 수정에 필요한 효소의 존재에서 화면을 실시 하기 위해 개발 되었다.
다른 버전은 일체형 막 단백질을 스크리닝 할 수있게하며,이 기술은 포유류 세포에서 단백질-단백질 상호 작용을 검출하도록 적응되었다 4. 마지막으로,효모 엔-하이브리드 프로토콜은 또한 새로운 단백질-단백질 5,아르 자형-단백질 6 및 작은 분자-단백질 상호 작용 7 을 선별하기 위해 고안되었다.
하이브리제닉스 발견 최신 최적화된 효모 2 하이브리드 스크린 서비스: 8989>
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1. 단백질-단백질 상호 작용을 검출하는 새로운 유전자 시스템(1989)자연 340,245-246
2. 이 연구에서는 세포 분열과 세포 분열에 대한 세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,세포 분열에 대한 연구,27(1), 38-50
3. Stagljar,I.,Korostensky,C.,Johnsson,N. 및 테 Heesen,S. 생체 내 막 단백질 간의 상호 작용 분석을 위해 분할 유비퀴틴을 기반으로 한 유전 시스템(1998)95(9), 5187-5192
4. 또한,본 발명의 실시예에 의하면,상기 제 1 실시예에 의하면,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 있어서,상기 제 2 실시예에 3(12), 1114-1119
5. 단일 하이브리드 시스템에 의한 효모 기원 인식 복합체의 구성 요소 인 오크 6 의 분리(1993)과학 262(5141), 1870-1874
6. 2018 년 11 월 1 일 1996)핵산 24,4838-4840
7. 1996 년 리간드-단백질을 검출하기 위한 3-하이브리드 시스템
수용체 상호 작용(1996 년)93(23),12817-12821