Premix WST-1 Buněčné Proliferace Systém umožňuje rychlé a jednoduché kolorimetrické měření buněčné proliferace a životaschopnost v 96-well formát, bez radioaktivních izotopů nebo organických rozpouštědlech. Systém proliferace buněk premixu WST-1 je také použitelný pro cytotoxické a inhibiční testy, kde produkce barviva spíše klesá než se zvyšuje.
kolorimetrický test je založen na štěpení trifenyltetrazolium sůl WST-1 na formazanu-class barvivo mitochondriální sukcinát-trifenyltetrazolium reduktázy v životaschopné buňky. Jak buňky proliferují, více WST-1 se převede na produkt formazan. Množství barviva formazanu je přímo úměrná počtu metabolicky aktivních buněk, a může být kvantifikováno měřením absorbance při 420-480 nm (Amax 450 nm) v multiwell plate reader.
protokol bez námahy
s testovacím systémem proliferace buněk premixu WST-1 nejsou vyžadovány žádné kroky praní, sklizně nebo solubilizace. Celý postup, od buněčné kultury po analýzu dat, může být proveden pomocí čtečky multiwell plate ve stejné 96 jamkové desce.
jakmile jsou vaše buňky kultivovány, může být test dokončen přibližně za 1 hodinu. Jednoduše přidejte do Namíchané WST-1 Buněčné Proliferace Činidla na talíř, kultura vašich buněk po dobu alespoň 30 min ve zvlhčené atmosféře (až do 4 hod., v závislosti na typu buňky a hustota) a změřit absorbanci. Barevný produkt je generován nepřetržitě, takže můžete sledovat průběh experimentu v průběhu času opakovaným čtením desky a jejím vrácením do inkubátoru pro další vývoj. To eliminuje dohady a zajišťuje, že optimální koncový bod testu není přehlížen.
Stabilní činidla
na Rozdíl od tradičních WST-1 assay činidel, které mohou být uchovávány pouze po dobu tří dnů při 4°C nebo jeden měsíc při -20°C, Namíchané WST-1 Buněčné Proliferace Činidla byl formulován pro zvýšení stability: může být skladován po dobu dvou týdnů při teplotě 4°C nebo jeden rok při -20°C. dodává se jako ready-to-use roztok obsahující WST-1 a elektron-spojovací činidla, naředěný ve fosfátovém fyziologickém roztoku.
neradioaktivní kolorimetrický test
mnoho testů proliferace buněk je založeno na měření radioaktivně značeného vychytávání nukleosidů během syntézy DNA. Předem smíchaný test činidla proliferace buněk WST-1 je neradioaktivní, což zvyšuje pohodlí a laboratorní bezpečnost. Navíc Namíchané WST-1 Buněčné Proliferace Činidla je ve vodě vysoce rozpustný ve srovnání s jinými trifenyltetrazolium soli používané v podobné testy, které mohou vyžadovat povrchově aktivní látky nebo organická rozpouštědla pro rozpuštění.
předem smíchané činidlo proliferace buněk WST-1 zjednoduší a zefektivní testy proliferace buněk. Jednoduchý protokol s jedním řešením šetří čas a snadno se používá ve formátu 96 jamek. Desky mohou být přečteny a vráceny do inkubátoru pro další vývoj, aby se zjednodušily experimenty s časovým průběhem.