Das Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System ermöglicht eine schnelle und einfache kolorimetrische Messung der Zellproliferation und Lebensfähigkeit in einem 96-Well-Format ohne radioaktive Isotope oder organische Lösungsmittel. Das Premix WST-1 Zellproliferations-Assay-System ist auch auf Zytotoxizitäts- und inhibitorische Assays anwendbar, bei denen die Farbstoffproduktion eher abnimmt als zunimmt.
Der kolorimetrische Assay basiert auf der Spaltung des Tetrazoliumsalzes WST-1 zu einem Farbstoff der Formazan-Klasse durch mitochondriale Succinat-Tetrazolium-Reduktase in lebensfähigen Zellen. Wenn sich die Zellen vermehren, wird mehr WST-1 in das Formazan-Produkt umgewandelt. Die Menge an Formazan-Farbstoff steht in direktem Zusammenhang mit der Anzahl der metabolisch aktiven Zellen und kann durch Messung der Extinktion bei 420-480 nm (Amax 450 nm) in einem Multiwell-Plattenleser quantifiziert werden.
Ein müheloses Protokoll
Mit dem Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System sind keine Wasch-, Ernte- oder Solubilisierungsschritte erforderlich. Das gesamte Verfahren, von der Zellkultur bis zur Datenanalyse, kann mit einem Multiwell-Plattenleser in derselben 96-Well-Platte durchgeführt werden.
Sobald Ihre Zellen kultiviert sind, kann der Test in etwa 1 Stunde abgeschlossen sein. Geben Sie einfach das vorgemischte WST-1-Zellproliferationsreagenz auf die Platte, kultivieren Sie Ihre Zellen mindestens 30 Minuten lang in einer befeuchteten Atmosphäre (bis zu 4 Stunden, abhängig von Zelltyp und Dichte) und messen Sie die Absorption. Das farbige Produkt wird kontinuierlich erzeugt, sodass Sie den Fortschritt Ihres Experiments im Laufe der Zeit überwachen können, indem Sie die Platte wiederholt lesen und zur weiteren Entwicklung in den Inkubator zurücksenden. Dies eliminiert Vermutungen und stellt sicher, dass der optimale Assay-Endpunkt nicht übersehen wird.
Stabile Reagenzien
Im Gegensatz zu herkömmlichen WST-1-Assayreagenzien, die nur drei Tage bei 4 ° C oder einen Monat bei -20 ° C gelagert werden können, wurde das vorgemischte WST-1-Zellproliferationsreagenz für eine erhöhte Stabilität formuliert: Es kann zwei Wochen bei 4 ° C oder ein Jahr bei -20 ° C gelagert werden. Es wird als gebrauchsfertige Lösung geliefert, die WST-1 und ein Elektronenkopplungsreagenz enthält, verdünnt in sterilen phosphatgepufferte Kochsalzlösung.
Nicht radioaktiver, kolorimetrischer Test
Viele Zellproliferationstests basieren auf Messungen der radioaktiv markierten Nukleosidaufnahme während der DNA-Synthese. Der vorgemischte WST-1-Zellproliferationsreagenz-Assay ist nicht radioaktiv, was den Komfort und die Laborsicherheit erhöht. Darüber hinaus ist das vorgemischte WST-1-Zellproliferationsreagenz im Vergleich zu anderen Tetrazoliumsalzen, die in ähnlichen Assays verwendet werden und für deren Auflösung möglicherweise Tenside oder organische Lösungsmittel erforderlich sind, sehr gut wasserlöslich.
Das vorgemischte WST-1 Zellproliferationsreagenz vereinfacht und rationalisiert Ihre Zellproliferationstests. Das einfache Protokoll mit einer Lösung spart Zeit und ist in einem 96-Well-Plattenformat einfach zu verwenden. Die Platten können gelesen und zur weiteren Entwicklung in den Inkubator zurückgebracht werden, um Zeitverlaufsexperimente zu vereinfachen.