Il sistema Premix WST-1 Cell Proliferation Assay consente una misurazione colorimetrica rapida e semplice della proliferazione cellulare e della vitalità in un formato a 96 pozzetti, senza isotopi radioattivi o solventi organici. Il sistema di analisi di proliferazione delle cellule premiscelate WST-1 è applicabile anche ai test di citotossicità e inibitori, dove la produzione di coloranti diminuisce piuttosto che aumenta.
Il test colorimetrico si basa sulla scissione del sale di tetrazolio WST-1 in un colorante di classe formazan da parte della succinato-tetrazolio reduttasi mitocondriale in cellule vitali. Mentre le cellule proliferano, più WST-1 viene convertito nel prodotto formazan. La quantità di colorante formazan è direttamente correlata al numero di cellule metabolicamente attive e può essere quantificata misurando l’assorbanza a 420-480 nm (Amax 450 nm) in un lettore di piastre multiwell.
Un protocollo senza sforzo
Non sono richieste fasi di lavaggio, raccolta o solubilizzazione con il sistema di analisi della proliferazione cellulare Premix WST-1. L’intera procedura, dalla coltura cellulare all’analisi dei dati, può essere eseguita con un lettore di piastre multiwell nella stessa piastra a 96 pozzetti.
Una volta che le cellule sono coltivate, il test può essere completato in circa 1 ora. Basta aggiungere il reagente premiscelato di proliferazione cellulare WST-1 alla piastra, coltivare le cellule per almeno 30 minuti in atmosfera umidificata (fino a 4 ore, a seconda del tipo e della densità delle cellule) e misurare l’assorbanza. Il prodotto colorato viene generato continuamente, in modo da poter monitorare lo stato di avanzamento dell’esperimento nel tempo leggendo ripetutamente la piastra e restituendola all’incubatore per un ulteriore sviluppo. Ciò elimina le congetture e garantisce che l’endpoint di dosaggio ottimale non venga trascurato.
Stabile reagenti
a Differenza dei tradizionali WST-1 reagenti del test, che possono essere memorizzati solo per tre giorni a 4°C o un mese a -20°C, Premiscelato, WST-1 la Proliferazione delle Cellule del Reagente è stato formulato per una maggiore stabilità: può essere conservato per due settimane a 4°C o un anno a -20°C. è fornito pronto per l’uso soluzione contenente WST-1 e un elettrone-accoppiamento reattivo, diluito in una sterile tampone fosfato salino.
Test colorimetrico non radioattivo
Molti test di proliferazione cellulare si basano su misurazioni dell’assorbimento nucleosidico marcato radioattivamente durante la sintesi del DNA. L’analisi premiscelata del reagente di proliferazione delle cellule WST-1 è nonradioactive, che migliora la convenienza e la sicurezza del laboratorio. Inoltre, il reagente premiscelato di proliferazione cellulare WST-1 è altamente solubile in acqua rispetto ad altri sali di tetrazolio utilizzati in saggi simili, che possono richiedere tensioattivi o solventi organici per la dissoluzione.
Il reagente premiscelato di proliferazione delle cellule WST-1 semplificherà e razionalizzerà i vostri saggi di proliferazione delle cellule. Il semplice protocollo a una soluzione consente di risparmiare tempo ed è facile da usare in un formato a 96 pozzetti. Le piastre possono essere lette e restituite all’incubatore per ulteriori sviluppi per semplificare gli esperimenti a tempo.