Näin löydät sieniä histologisista Näytteistäsi-Go For GMS!

Gomorin metenamiinihopea (GMS) on toinen yleisesti käytetty erityinen tahra histologialaboratoriossa.

mitä GMS tahraa?

(1) sienet

GMS tunnetaan luultavasti parhaiten sienieliöiden värjäyksestä. Sienet ovat yleensä suhteellisen suuria ja morfologisesti monimuotoisia, ja niitä voi esiintyä kudoksissa eri muodoissa: hyphae, endosporating itiöt, orastava hiivat, tai näiden yhdistelmä.

klassiset piirteet

joidenkin sieni-infektioiden aiheuttajana on eräs sienilaji, jolla on hyvin tyypillinen morfologia, ja siksi ne voidaan todeta suhteellisen helposti hematoksyliini-ja eosiinijaksoilla (H& E), kun nähdään niiden klassiset piirteet. Näitä ovat lajit Cryptococcus, sekä muut kuten Histoplasma, Blastomyces, Coccidiomyces, Rhinosporidium, ja Prototheca.

kun pelkkään histologiaan ei voi luottaa

muut infektiot voivat kuitenkin johtua jostakin monista suvun lajeista. Koska nämä kaikki näyttävät samanlaisilta kudosjaksoissa, histologia ei yksin pysty lopullisesti tunnistamaan kyseistä lajia, mutta se voi ainakin auttaa luokittelemaan sienitaudin laajasti. Näin on esimerkiksi aspergilloosin ja kandidiaasin kohdalla.

ne kaikki näyttävät minusta samalta

lisäksi joitakin infektioita voi aiheuttaa jopa joukko eri sukuihin kuuluvia sieniä. Nämä eri sienet voivat näyttää samanlaisilta kudoksessa, joten tarkkaa organismia ei voida lopullisesti tunnistaa. H&e-värjättyjen osien tutkiminen voi ainakin auttaa luokittelemaan laajasti sienitaudin, kuten feohyfomykoosin tai tsygomykoosin.

nopea ja helppo

kudosten mikroskooppinen arviointi on nopea ja helppo tapa tunnistaa sienieliöt. Nämä eri muodot voidaan usein tunnistaa h&e-värjätyistä kudososista. Kuitenkin, vaikka H&E on valittu tahra luonnollisesti pigmentoituneiden sienten (ja hiivan kaltaisten solujen tumien) tunnistamiseksi, ei ole suositeltavaa käyttää tätä tahraa yksinään sieni-infektioiden diagnosointiin. Tämä johtuu siitä, että jotkin sienet saattavat jäädä helposti huomaamatta H&e-värjätyissä kohdissa, varsinkin jos ne eivät ole luonnostaan pigmentoituneita tai jos niitä on vähän. Huonosti värjäytyneitä sieniä voi myös olla vaikea erottaa kudoskomponenteista h&e-värjätyissä osissa. Lisäksi sienen tunnistaminen voi olla vaikeaa, jos klassiset piirteet joko puuttuvat tai muuttuvat – joista jälkimmäinen voi esiintyä sienihoidon yhteydessä.

joten, kun kudoksista löytyy histologista näyttöä granulomatoottisesta tulehduksesta tai varsinaisesta granuloomasta, tehdään yleensä erityisiä tahroja sellaisten tarttuvien eliöiden varalta, jotka voivat aiheuttaa tällaisia muutoksia – nimittäin sienten ja happamat nopeat bakteerit.

(2) muut organismit

GMS voi olla hyödyllinen tahra myös muiden organismien tunnistamisessa:

levät kuten Prototheca spp. andChlorella spp.
Pneumocystis spp. tahraa niiden kystaseinän
Mikroporidiaanit värjäävät itiöpesäkkeensä
joitakin bakteereita Nocardia spp., Mycobacterium spp., ja ei-filamenttiset bakteerit polysakkaridikapseleilla, kuten asKlebsiella pneumoniae andStreptococcus pneumoniae.

yleiset periaatteet tahra

GMS on kromihappo, natriumbisulfiitti tahra.

GMS-tahran alkuvaihe on samanlainen kuin jaksollisen happo-Schiff (PAS) – tahran siinä, että se käyttää kromihappoa hapettimena. Tämän vaiheen aikana kromihappo hapettuu muodostaen aldehydejä sienisoluseinän mukopolysakkaridikomponenteista.

kudos käsitellään tämän jälkeen metenamiinihopeanitraattiliuoksella. Tässä vaiheessa aldehydiryhmät reagoivat hopeanitraatin kanssa pelkistäen sen metalliseksi hopeaksi, joka näyttää mustalta.

toisin kuin PAS-värjäyksessä, kromihappo on kuitenkin jaksollista happoa voimakkaampi hapettava aine ja hapettaa joitakin aldehydiryhmiä edelleen tuottaen ainetta, joka ei kykene reagoimaan hopeaionien kanssa. Kudosten kollageenitausta ei siis tahraa.

kun käytetään vaaleanvihreää liuosta, sieni-elementit värjäävät mustaksi terävillä reunoilla ja selvällä keskustalla vaaleanvihreää kudostaustaa vasten.

GMS vs. PAS

GMS ja PAS ovat kaksi yleisintä tahraa, joita käytetään sienten tarkistamiseen kudoksista. Molempia pidetään ”laajakirjoisina” sienitahroina, sillä useimmat sienet ovat helposti nähtävissä jommallakummalla tahrolla.

GMS: n yksi etu on se, että se tuottaa paremman värjäyskontrastin kudosten osissa ja havaitsee jopa degeneroituneita ja kuolleita sieniä, joita PAS-tahra ei välttämättä havaitse. Tämä tekee GMS: stä paremman valinnan kudosten yleiseen seulontaan sieni-infektion varalta.

kuka käyttää GMS-tahraa?

tätä tahraa käytetään laajalti sekä diagnostisiin että tutkimustarkoituksiin. Esimerkiksi sienieliöitä tutkivat tutkijat voivat rutiininomaisesti tutkia GMS: n värjäämiä kohtia arvioidakseen tiettyjä sienielementtejä kiinnostavissa kudoksissa.

diagnostisissa laboratorioissa GMS-kudosvärjäystä käytetään usein yhdessä mikrobiologisen viljelyn kanssa sieni-infektioiden diagnosointiin ihmisillä ja eläimillä, koska sienieliöiden esiintyminen kudoksissa viittaa invasiiviseen infektioon. Siksi patologit käyttävät tätä tahraa usein vastatakseen kysymyksiin tutkittuaan rutiininomaisia H&e-värjättyjä kohtia, jotka sisältävät sieni-infektioon viittaavia muutoksia.

miten GMS: ää käytetään yleisimmin laboratoriossasi?

onko tämä auttanut sinua? Jaa sitten verkkosi kanssa.

kirjoittanut Nicola Parry

You might also like

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.