Cum de a găsi ciuperci în probele de Histologie – du-te pentru GMS!

Gomori ‘ s methenamine silver (GMS) este o altă pată specială utilizată în mod obișnuit în laboratorul de histologie.

ce pătează GMS?

(1) Fungi

GMS este, probabil, cel mai bine cunoscut pentru colorarea organismelor fungice. Ciupercile sunt, în general, relativ mari și morfologic diverse și pot apărea în țesuturi sub diferite forme: hife, spori endosporulatori, drojdii în devenire sau o combinație a acestor forme.

caracteristici clasice

unele infecții fungice sunt cauzate de o specie de ciuperci cu morfologie foarte caracteristică și, prin urmare, pot fi diagnosticate relativ ușor pe secțiuni colorate cu hematoxilină și eozină (H & E) atunci când sunt observate caracteristicile lor clasice. Acestea includ specii de criptococ, precum și altele precum Histoplasma, Blastomyces, Coccidiomyces, Rhinosporidium și Prototheca.

când nu ne putem baza doar pe histologie

alte infecții, totuși, se pot datora uneia dintre numeroasele specii ale unui gen. Deoarece toate acestea par similare în secțiunile de țesut, histologia singură nu poate identifica definitiv speciile implicate, dar poate ajuta cel puțin la clasificarea pe scară largă a bolii fungice. Acesta este cazul aspergilozei și candidozei, de exemplu.

toate arată la fel pentru mine

în plus, unele infecții pot fi chiar cauzate de un număr de ciuperci aparținând diferitelor genuri. Aceste ciuperci diferite pot apărea similare în țesut, astfel încât organismul exact nu poate fi identificat definitiv. Examinarea secțiunilor h &e-colorate poate ajuta cel puțin la clasificarea pe scară largă a bolii fungice, cum ar fi phaeohyphomycosis sau zygomycosis.

rapid și ușor

evaluarea microscopică a țesuturilor este o modalitate rapidă și ușoară de a identifica organismele fungice. Aceste forme diferite pot fi adesea identificate în secțiunile de țesut h &e-colorate. Cu toate acestea, deși H&E este pata de alegere pentru a identifica ciupercile pigmentate natural (și nucleele celulelor asemănătoare drojdiei), nu este recomandabil să folosiți această pată izolat pentru a diagnostica infecțiile fungice. Acest lucru se datorează faptului că unele ciuperci pot fi ușor trecute cu vederea în secțiunile h&e-colorate, mai ales dacă nu sunt pigmentate în mod natural sau dacă sunt prezente în număr redus. De asemenea, poate fi dificil să se diferențieze ciupercile slab colorate de componentele țesuturilor în secțiunile h&e-colorate. În plus, identificarea fungică poate fi dificilă dacă caracteristicile clasice sunt fie absente, fie modificate – acestea din urmă pot apărea în asociere cu terapia fungică.

deci, atunci când se găsesc dovezi histologice de inflamație granulomatoasă sau granuloame reale în țesuturi, se efectuează, în general, pete speciale pentru a verifica prezența organismelor infecțioase care pot provoca astfel de modificări – și anume ciuperci și bacterii rapide acide.

(2) alte organisme

AGA poate fi o pată utilă pentru a identifica și alte organisme:

alge cum ar fi Prototheca spp. andChlorella spp.
Pneumocystis spp. își pătează peretele chistului
organismele Microsporidiene își pătează stratul de spori
unele organisme bacteriene Nocardia spp., Mycobacterium spp., și bacterii non-filamentoase cu capsule polizaharidice, cum ar fiklebsiella pneumoniae șistreptococcus pneumoniae.

principiile generale ale petelor

GMS este o pată de acid cromic, bisulfit de sodiu.

etapa inițială a petei GMS este similară cu cea a petei periodice acid-Schiff (PAS) prin faptul că folosește acidul cromic ca agent oxidant. În timpul acestei etape, oxidarea acidului cromic formează aldehide din componentele mucopolizaharidelor peretelui celular fungic.

țesutul este apoi tratat cu soluție de azotat de argint de metenamină. În timpul acestei etape, grupările aldehidice reacționează cu azotatul de argint, reducându-l la argint metalic, care apare negru.

spre deosebire de pata PAS, totuși, acidul cromic este un agent oxidant mai puternic decât acidul periodic și va oxida în continuare unele dintre grupările aldehidice, producând o substanță care nu poate reacționa cu ionii de argint. Prin urmare, fundalul colagenic din țesuturi nu pătează.

atunci când se utilizează o contra-pată de soluție verde deschis, elementele fungice se colorează negru cu margini ascuțite și un centru curățat, pe un fundal de țesut verde deschis.

GMS versus PAS

GMS și PAS sunt cele două pete cele mai frecvente utilizate pentru a verifica ciupercile din țesuturi. Ambele sunt considerate pete fungice cu spectru larg, deoarece majoritatea ciupercilor pot fi văzute cu ușurință cu oricare dintre pete.

un avantaj al GMS este că produce un contrast mai bun de colorare în secțiunile țesuturilor și detectează chiar și ciupercile degenerate și moarte care nu pot fi detectate de pata PAS. Acest lucru face ca GMS să fie o alegere mai bună pentru screeningul general al țesuturilor pentru infecții fungice.

cine folosește pata GMS?

această pată este utilizată pe scară largă atât în scopuri de diagnostic, cât și de cercetare. De exemplu, cercetătorii care studiază organismele fungice pot examina în mod obișnuit secțiunile colorate de GMS pentru a evalua anumite elemente fungice din țesuturile de interes.

în laboratoarele de diagnostic, colorarea țesuturilor GMS este adesea utilizată în combinație cu cultura microbiologică pentru diagnosticarea infecțiilor fungice la oameni și animale, deoarece prezența organismelor fungice în țesuturi indică o infecție invazivă. Prin urmare, patologii vor folosi adesea această pată pentru a ajuta la răspunsul la întrebări după examinarea secțiunilor de rutină H&e-colorate care conțin modificări sugestive pentru infecția fungică.

cum se utilizează cel mai frecvent GMS în laboratorul dumneavoastră?

te-a ajutat asta? Apoi, vă rugăm să partajați cu rețeaua.

scris de Nicola Parry

You might also like

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.