Hur man hittar svampar i dina Histologiprover-gå till GMS!

Gomori ’ s metenamin silver (GMS) är en annan vanlig speciell fläck i histologilaboratoriet.

vad fläckar GMS?

(1) svampar

GMS är förmodligen mest känd för färgning av svamporganismer. Svampar är i allmänhet relativt stora och morfologiskt olika och kan förekomma i vävnader i olika former: hyfer, endosporulerande sporer, spirande jäst eller en kombination av dessa former.

klassiska egenskaper

vissa svampinfektioner orsakas av en svampart med mycket karakteristisk morfologi och kan därför diagnostiseras relativt enkelt på hematoxylin och eosin (H& e)-färgade sektioner när deras klassiska egenskaper ses. Dessa inkluderar arter av Cryptococcus, liksom andra som Histoplasma, Blastomyces, Coccidiomyces, Rhinosporidium och Prototheca.

när vi inte kan lita på histologi ensam

andra infektioner kan dock bero på en av många arter av ett släkte. Eftersom dessa alla verkar likartade i vävnadssektioner, kan histologi ensam inte definitivt identifiera de berörda arterna, men kan åtminstone bidra till att i stort sett kategorisera svampsjukdomen. Detta är till exempel fallet med aspergillos och candidiasis.

de ser alla likadana ut för mig

Dessutom kan vissa infektioner till och med orsakas av ett antal svampar som tillhör olika släkter. Dessa olika svampar kan verka lika i vävnaden, så den exakta organismen kan inte definitivt identifieras. Undersökning av H&e-färgade sektioner kan åtminstone hjälpa till att i stor utsträckning kategorisera svampsjukdomen såsom phaeohyphomycosis eller zygomycosis.

snabbt och enkelt

mikroskopisk utvärdering av vävnader är ett snabbt och enkelt sätt att identifiera svamporganismer. Dessa olika former kan ofta identifieras i h&e-färgade vävnadssektioner. Men även om H& E är den valda fläcken för att identifiera naturligt pigmenterade svampar (och kärnorna i jästliknande celler) är det inte tillrådligt att använda denna fläck isolerat för att diagnostisera svampinfektioner. Detta beror på att vissa svampar lätt kan förbises i h&e-färgade sektioner, särskilt om de inte är naturligt pigmenterade, eller om de finns i låga antal. Det kan också vara svårt att skilja dåligt färgade svampar från vävnadskomponenter i h&e-färgade sektioner. Dessutom kan svampidentifiering vara svårt om klassiska funktioner antingen saknas eller förändras – varav den senare kan uppstå i samband med svampterapi.

så, när histologiska bevis på granulomatös inflammation eller faktiska granulom finns i vävnader, utförs speciella fläckar i allmänhet för att kontrollera förekomsten av smittsamma organismer som kan orsaka sådana förändringar – nämligen svampar och syrafasta bakterier.

(2) andra organismer

GMS kan vara en användbar fläck för att identifiera andra organismer också:

Alger såsom Prototheca spp. andChlorella spp.
Pneumocystis spp. fläckar sin cystvägg
Microsporidian organismer fläckar deras spore coat
vissa bakterieorganismer Nocardia spp., Mycobacterium spp.och icke-filamentösa bakterier med polysackaridkapslar, såsom asKlebsiella pneumoniae ochstreptococcus pneumoniae.

allmänna principer för fläcken

GMS är en kromsyra, natriumbisulfit fläck.

det första steget i GMS-fläcken liknar det för den periodiska syra-Schiff (PAS) – fläcken genom att den använder kromsyra som ett oxidationsmedel. Under detta steg bildar kromsyraoxidation aldehyder från mukopolysackaridkomponenter i svampcellväggen.

vävnaden behandlas sedan med metenamin silvernitratlösning. Under detta steg reagerar aldehydgrupperna med silvernitratet och reducerar det till metalliskt silver, vilket verkar svart.

i motsats till PAS-fläck är emellertid kromsyra ett starkare oxidationsmedel än periodisk syra och kommer att oxidera några av aldehydgrupperna ytterligare och producera ett ämne som inte kan reagera med silverjoner. Den kollagenösa bakgrunden i vävnader fläckar därför inte.

när en motfärg av ljusgrön lösning används, fläckar svampelementen svart med skarpa marginaler och ett rensat centrum mot en ljusgrön vävnadsbakgrund.

GMS kontra PAS

GMS och PAS är de två vanligaste fläckarna som används för att kontrollera svampar i vävnader. Båda betraktas som ’bredspektrum’ svampfläckar, eftersom de flesta svampar lätt kan ses med antingen fläck.

en fördel med GMS är att det ger bättre färgkontrast i vävnadssektioner och upptäcker även degenererade och döda svampar som kanske inte detekteras av PAS-fläck. Detta gör GMS till ett bättre val för allmän screening av vävnader för svampinfektion.

Vem använder GMS Stain?

denna fläck används i stor utsträckning för både diagnostiska och forskningsändamål. Till exempel kan forskare som studerar svamporganismer rutinmässigt undersöka GMS-färgade sektioner för att utvärdera vissa svampelement i vävnader av intresse.

i diagnostiska laboratorier används GMS-vävnadsfärgning ofta i kombination med mikrobiologisk kultur för diagnos av svampinfektioner hos människor och djur, eftersom närvaron av svamporganismer i vävnader indikerar en invasiv infektion. Därför kommer patologer ofta att använda denna fläck för att svara på frågor efter att ha undersökt rutin h&e-färgade sektioner som innehåller förändringar som tyder på svampinfektion.

Hur används GMS oftast i ditt labb?

har detta hjälpt dig? Vänligen dela med ditt nätverk.

skriven av Nicola Parry

You might also like

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.