So finden Sie Pilze in Ihren Histologieproben – Entscheiden Sie sich für GMS!

Gomoris Methenaminsilber (GMS) ist ein weiterer häufig verwendeter Spezialfärbemittel im Histologielabor.

Was bedeutet GMS?

(1) Pilze

GMS ist wahrscheinlich am besten für die Färbung von Pilzorganismen bekannt. Pilze sind im Allgemeinen relativ groß und morphologisch vielfältig und können in Geweben in verschiedenen Formen auftreten: Hyphen, endosporöse Sporen, knospende Hefen oder eine Kombination dieser Formen.

Klassische Merkmale

Einige Pilzinfektionen werden durch eine Pilzart mit sehr charakteristischer Morphologie verursacht und können daher relativ leicht an Hämatoxylin- und Eosin (H& E) -gefärbten Abschnitten diagnostiziert werden, wenn ihre klassischen Merkmale sichtbar sind. Dazu gehören Arten von Cryptococcus sowie andere wie Histoplasma, Blastomyces, Coccidiomyces, Rhinosporidium und Prototheca.

Wenn wir uns nicht allein auf die Histologie verlassen können

Andere Infektionen können jedoch auf eine von vielen Arten einer Gattung zurückzuführen sein. Da diese alle in Gewebeschnitten ähnlich aussehen, kann die Histologie allein die betroffenen Arten nicht eindeutig identifizieren, aber zumindest helfen, die Pilzkrankheit breit zu kategorisieren. Dies ist beispielsweise bei Aspergillose und Candidiasis der Fall.

Sie sehen für mich alle gleich aus

Darüber hinaus können einige Infektionen sogar durch eine Reihe von Pilzen verursacht werden, die verschiedenen Gattungen angehören. Diese verschiedenen Pilze können im Gewebe ähnlich erscheinen, so dass der genaue Organismus nicht definitiv identifiziert werden kann. Die Untersuchung von H&E-gefärbten Schnitten kann zumindest helfen, die Pilzkrankheit wie Phaeohyphomykose oder Zygomykose breit zu kategorisieren.

Schnell und einfach

Die mikroskopische Untersuchung von Geweben ist eine schnelle und einfache Möglichkeit, Pilzorganismen zu identifizieren. Diese verschiedenen Formen können oft in H& E-gefärbten Gewebeschnitten identifiziert werden. Obwohl H & E der Fleck der Wahl ist, um natürlich pigmentierte Pilze (und die Kerne hefeartiger Zellen) zu identifizieren, ist es nicht ratsam, diesen Fleck isoliert zur Diagnose von Pilzinfektionen zu verwenden. Dies liegt daran, dass einige Pilze in H & E-gefärbten Abschnitten leicht übersehen werden können, insbesondere wenn sie nicht natürlich pigmentiert sind oder in geringer Anzahl vorhanden sind. Es kann auch schwierig sein, schlecht gefärbte Pilze von Gewebebestandteilen in H & E-gefärbten Abschnitten zu unterscheiden. Darüber hinaus kann die Identifizierung von Pilzen schwierig sein, wenn klassische Merkmale entweder fehlen oder verändert sind – letztere können in Verbindung mit einer Pilztherapie auftreten.

Wenn also histologische Hinweise auf granulomatöse Entzündungen oder tatsächliche Granulome in Geweben gefunden werden, werden im Allgemeinen spezielle Färbungen durchgeführt, um das Vorhandensein infektiöser Organismen zu überprüfen, die solche Veränderungen verursachen können – nämlich Pilze und säurefeste Bakterien.

(2) Andere Organismen

GMS kann eine nützliche Färbung sein, um auch andere Organismen zu identifizieren:

Algen Wie Prototheca spp. Chlorella spp.
Pneumocystis spp. Befleckt ihre Zystenwand
Mikrosporidische Organismen Färben ihren Sporenmantel
Einige bakterielle Organismen Nocardia spp., Mycobacterium spp.,und nicht-filamentöse Bakterien mit Polysaccharidkapseln, wie asKlebsiella pneumoniae undStreptococcus pneumoniae.

Allgemeine Prinzipien des Flecks

GMS ist ein Chromsäure-Natriumbisulfit-Fleck.

Der erste Schritt der GMS-Färbung ähnelt dem der Periodsäure-Schiff-Färbung (PAS), da Chromsäure als Oxidationsmittel verwendet wird. Während dieses Schritts bildet die Chromsäureoxidation Aldehyde aus Mucopolysaccharidkomponenten der Pilzzellwand.

Anschließend wird das Gewebe mit Methenaminsilbernitratlösung behandelt. Während dieses Schritts reagieren die Aldehydgruppen mit dem Silbernitrat und reduzieren es zu metallischem Silber, das schwarz erscheint.

Im Gegensatz zu PAS ist Chromsäure jedoch ein stärkeres Oxidationsmittel als Periodsäure und oxidiert einige der Aldehydgruppen weiter, wodurch eine Substanz entsteht, die nicht mit Silberionen reagieren kann. Der kollagene Hintergrund in Geweben färbt sich daher nicht.

Wenn ein Gegenfleck aus hellgrüner Lösung verwendet wird, färben sich die Pilzelemente schwarz mit scharfen Rändern und einem gereinigten Zentrum vor einem hellgrünen Gewebehintergrund.

GMS versus PAS

GMS und PAS sind die beiden häufigsten Färbungen, die zur Überprüfung auf Pilze in Geweben verwendet werden. Beide gelten als Pilzflecken mit breitem Spektrum, da die meisten Pilze mit beiden Flecken leicht zu sehen sind.

Ein Vorteil von GMS ist, dass es einen besseren Färbekontrast in Gewebeschnitten erzeugt und sogar degenerierte und tote Pilze erkennt, die möglicherweise nicht durch PAS-Färbung nachgewiesen werden. Dies macht GMS zu einer besseren Wahl für das allgemeine Screening von Geweben auf Pilzinfektionen.

Wer nutzt GMS Stain?

Dieser Fleck wird sowohl für diagnostische als auch für Forschungszwecke verwendet. Zum Beispiel können Forscher, die Pilzorganismen untersuchen, routinemäßig GMS-gefärbte Abschnitte untersuchen, um bestimmte Pilzelemente in Geweben von Interesse zu bewerten.

In diagnostischen Labors wird die GMS-Gewebefärbung häufig in Kombination mit mikrobiologischer Kultur zur Diagnose von Pilzinfektionen bei Menschen und Tieren verwendet, da das Vorhandensein von Pilzorganismen in Geweben auf eine invasive Infektion hinweist. Daher verwenden Pathologen diesen Fleck häufig, um Fragen zu beantworten, nachdem sie routinemäßige H & E-gefärbte Abschnitte untersucht haben, die Veränderungen enthalten, die auf eine Pilzinfektion hindeuten.

Wie wird GMS in Ihrem Labor am häufigsten eingesetzt?

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Geschrieben von Nicola Parry

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