Jak znaleźć grzyby w próbkach histologicznych – przejdź do GMS!

gomori ’ s Methenamine silver (GMS) jest kolejną powszechnie stosowaną specjalną plamą w laboratorium histologicznym.

co plami GMS?

(1) Grzyby

GMS jest prawdopodobnie najbardziej znany z barwienia organizmów grzybowych. Grzyby są na ogół stosunkowo duże i zróżnicowane morfologicznie i mogą występować w tkankach w różnych formach: strzępkach, zarodnikach endosporulujących, drożdżach pączkujących lub kombinacji tych form.

cechy klasyczne

niektóre zakażenia grzybicze są wywoływane przez gatunek grzybów o bardzo charakterystycznej morfologii i dlatego można je stosunkowo łatwo zdiagnozować na uszkodzonych hematoksylinach i eozynach (H&E), gdy widoczne są ich klasyczne cechy. Należą do nich gatunki Cryptococcus, a także inne, takie jak Histoplasma, Blastomyces, Coccidiomyces, Rhinosporidium i Prototheca.

kiedy nie możemy polegać tylko na histologii

inne infekcje mogą być jednak spowodowane jednym z wielu gatunków rodzaju. Ponieważ wszystkie te objawy wydają się podobne w sekcjach tkanek, sama histologia nie może ostatecznie zidentyfikować danego gatunku, ale może przynajmniej pomóc w ogólnej klasyfikacji choroby grzybiczej. Tak jest na przykład w przypadku aspergilozy i kandydozy.

dla mnie wszystkie wyglądają tak samo

dodatkowo niektóre infekcje mogą być nawet spowodowane przez wiele grzybów należących do różnych rodzajów. Te różne grzyby mogą pojawić się podobne w tkance, więc dokładny organizm nie może być ostatecznie zidentyfikowany. Badanie sekcji H&zabarwionych E może przynajmniej pomóc w ogólnej klasyfikacji chorób grzybiczych, takich jak phaeohyphomycosis lub zygomycosis.

szybka i łatwa

mikroskopowa ocena tkanek to szybki i łatwy sposób identyfikacji organizmów grzybiczych. Te różne formy często mogą być zidentyfikowane w H&e-poplamione sekcje tkanek. Jednakże, chociaż H& E jest plamą z wyboru do identyfikacji naturalnie pigmentowanych grzybów (i jąder komórek drożdżopodobnych), nie zaleca się stosowania tej plamy w izolacji do diagnozowania zakażeń grzybiczych. Dzieje się tak, ponieważ niektóre grzyby mogą być łatwo przeoczone w sekcjach H&e-barwionych, zwłaszcza jeśli nie są naturalnie pigmentowane lub jeśli są obecne w małej liczbie. Trudno jest również odróżnić słabo zabarwione grzyby od składników tkankowych w sekcjach H&e-zabarwionych. Ponadto identyfikacja grzybicy może być trudna, jeśli klasyczne cechy są nieobecne lub zmienione-te ostatnie mogą wystąpić w związku z terapią grzybiczą.

Tak więc, gdy histologiczne dowody ziarniniakowego zapalenia lub rzeczywistych ziarniniaków znajduje się w tkankach, specjalne plamy są zazwyczaj wykonywane w celu sprawdzenia obecności organizmów zakaźnych, które mogą powodować takie zmiany-a mianowicie grzybów i bakterii kwasoodpornych.

(2) inne organizmy

GMS może być użyteczną plamą do identyfikacji innych organizmów:

glony takie jak Prototheca spp. andChlorella spp.
Pneumocystis spp. plami ścianę torbieli
Mikrosporidian organizmy plami ich sierść zarodników
niektóre organizmy bakteryjne Nocardia spp., Mycobacterium spp., oraz nie-nitkowate bakterie z kapsułkami polisacharydowymi, takie jak asKlebsiella pneumoniae istreptococcus pneumoniae.

ogólne zasady bejcy

GMS to kwas chromowy, wodorosiarczyn sodu.

początkowy etap bejcy GMS jest podobny do okresowej bejcy kwasowej-Schiff (PAS), ponieważ wykorzystuje kwas chromowy jako środek utleniający. Podczas tego etapu utlenianie kwasem chromowym tworzy aldehydy ze składników mukopolisacharydów ściany komórkowej grzybów.

tkanka jest następnie traktowana roztworem azotanu srebra methenaminy. Podczas tego etapu grupy aldehydowe reagują z azotanem srebra, redukując go do metalicznego srebra, które wydaje się czarne.

w przeciwieństwie do plamy PAS, jednak kwas chromowy jest silniejszym środkiem utleniającym niż kwas okresowy i utlenia dalej niektóre grupy aldehydowe, tworząc substancję, która nie może reagować z jonami srebra. Kolagenowe tło w tkankach nie plami.

gdy stosuje się kontrastowanie jasnozielonego roztworu, elementy grzybicze zabarwiają się na czarno z ostrymi marginesami i oczyszczonym środkiem, na jasnozielonym tle tkanki.

GMS kontra PAS

GMS i PAS to dwa najczęstsze plamy używane do sprawdzania grzybów w tkankach. Oba są uważane za „szerokie spektrum” plam grzybowych, ponieważ większość grzybów można łatwo zobaczyć w przypadku obu plam.

jedną z zalet GMS jest to, że wytwarza lepszy kontrast barwienia w sekcjach tkanek i wykrywa nawet zdegenerowane i martwe grzyby, które nie mogą być wykryte przez plamę PAS. To sprawia, że GMS lepszym wyborem dla ogólnego badania przesiewowego tkanek pod kątem infekcji grzybiczej.

kto używa plam GMS?

ta plama jest szeroko stosowana zarówno do celów diagnostycznych, jak i badawczych. Na przykład naukowcy badający organizmy grzybicze mogą rutynowo badać sekcje barwione GMS w celu oceny niektórych elementów grzybiczych w interesujących tkankach.

w laboratoriach diagnostycznych barwienie tkanek GMS jest często stosowane w połączeniu z hodowlą mikrobiologiczną do diagnostyki zakażeń grzybiczych u ludzi i zwierząt, ponieważ obecność organizmów grzybiczych w tkankach wskazuje na inwazyjną infekcję. Dlatego patolodzy często używają tej plamy, aby pomóc odpowiedzieć na pytania po zbadaniu rutynowych sekcji H&e-barwionych, które zawierają zmiany sugerujące infekcję grzybiczą.

jak najczęściej stosuje się GMS w Twoim laboratorium?

czy to ci pomogło? Następnie podziel się z siecią.

napisał Nicola Parry

You might also like

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.