Dernière Mise à jour le 4 février 2021 par Sagar Aryal
La gélose Salmonella Shigella (SS) est un milieu modérément sélectif et différentiel pour l’isolement, la culture et la différenciation de Salmonella spp. et certaines souches de Shigella spp. La gélose SS est une modification de la gélose au citrate de désoxycholate. Il est recommandé de tester les échantillons cliniques et les tests alimentaires pour détecter la présence de Salmonella spp. et quelques Shigella spp. La gélose SS est un milieu modérément sélectif dans lequel les bactéries à gram positif sont inhibées par les sels biliaires, le vert brillant et le citrate de sodium. La gélose Salmonella Shigella (SS) est hautement sélective pour les espèces de Salmonella, mais inhibe certaines souches de Shigella. Il a été développé pour faciliter la différenciation des fermenteurs lactose et non lactose à partir d’échantillons cliniques, d’aliments suspects et d’autres échantillons de ce type.
Principe de la gélose SS
La gélose Salmonella Shigella comprend des sels biliaires, du citrate de sodium, du vert brillant, un digest enzymatique de caséine, de l’extrait de bœuf, un digest enzymatique de tissus animaux, du thiosulfate, du citrate ferrique, du rouge neutre et de la gélose. L’inclusion de sels biliaires, de citrate de sodium et de Vert brillant sert à inhiber les organismes coliformes à gram positif et à inhiber l’essaimage de Proteus spp., tout en permettant Salmonella spp. grandir. L’extrait de bœuf, le Digest enzymatique de la Caséine et le Digest enzymatique des tissus animaux fournissent des sources d’azote, de carbone et de vitamines nécessaires à la croissance de l’organisme. Le lactose sert de source de glucides dans la gélose Salmonella Shigella. La différenciation des organismes entériques est obtenue par l’incorporation de lactose dans le milieu. Les organismes qui fermentent le lactose produisent de l’acide qui, en présence de l’indicateur rouge neutre, entraîne la formation de colonies rouges/ roses. Les non fermenteurs de lactose forment des colonies incolores. Le thiosulfate de sodium et le citrate ferrique permettent la détection du sulfure d’hydrogène par la production de colonies à centres noirs. Le rouge neutre devient rouge en présence d’un pH acide, montrant ainsi que la fermentation s’est produite.
Composition de Gélose SS
| Ingrédients | Gms/litre |
| Lactose | 10.0 |
| Sels biliaires non.3 | 8.5 |
| Citrate de sodium | 8.5 |
| Thiosulfate de sodium | 8.5 |
| Extrait de boeuf | 5.0 |
| Protéose peptone | 5.0 |
| Citrate Ferrique | 1.0 |
| Vert brillant | 0.00033 |
| Rouge neutre | 0.025 |
| Gélose | 13.5 |
Ph final 7.0 +/- 0.2 à 25ºC.
Préparation de Gélose SS
- Suspendre 60 g du milieu dans un litre d’eau désionisée ou distillée.
- Bien mélanger.
- Chauffer avec une agitation fréquente et faire bouillir pendant une minute.
- Ne pas autoclave le support.
- Verser dans des assiettes.
- Laisser la gélose se solidifier et conserver au réfrigérateur (éviter de congeler). Les milieux de culture préparés peuvent être conservés au moins une semaine au réfrigérateur.
Interprétation des résultats de la gélose SS
| Organismes | Résultat |
| Shigella | Transparent, incolore, transparent |
| Escherichia coli | Petit, rose à rouge |
| Enterobacter, Klebsiella | Plus grand que E.coli, mucoïde, pâle, crème opaque à rose |
| Salmonella | Incolore, transparente, avec un centre noir si H2S est produit |
| Proteus | Incolore, avec centre noir |
Utilisations de la gélose SS
- Il est utilisé comme milieu sélectif et différentiel pour l’isolement de Salmonella et de certaines espèces de Shigella à partir d’échantillons cliniques et non cliniques.
- Ce milieu n’est pas recommandé pour l’isolement primaire de Shigella.
- Il a également été développé pour faciliter la différenciation des fermenteurs lactose et non lactose à partir d’échantillons cliniques, d’aliments suspects et d’autres échantillons de ce type.
Limites de la gélose SS
- L’incorporation de vert brillant dans ce milieu le rend très sélectif et il a été démontré qu’il inhibe la croissance de certaines Shigelles.
- Les sels biliaires peuvent cristalliser avec le temps. Ils apparaissent comme de petites boules bouffantes ressemblant à des araignées dans le milieu et n’affectent pas les performances du milieu.
- Certaines souches de Shigella, telles que Shigella sonnei et S. dysenteriae serovar 1, peuvent fermenter le lactose relativement lentement, et les colonies se transforment en fermentation du lactose après une culture de 2 jours ou plus.
- Quelques organismes non pathogènes peuvent se développer sur la gélose à Salmonella Shigella.
- Il est recommandé d’effectuer des tests biochimiques, immunologiques, moléculaires ou de spectrométrie de masse sur des colonies issues de culture pure pour une identification complète.