Zuletzt aktualisiert am 4. Februar 2021 von Sagar Aryal
Salmonella Shigella (SS) Agar ist ein mäßig selektives und differentielles Medium zur Isolierung, Kultivierung und Differenzierung von Salmonella spp. und einige Stämme von Shigella spp. SS-Agar ist eine Modifikation des Desoxycholatcitrat-Agar. Es wird empfohlen, klinische Proben und Lebensmitteltests auf das Vorhandensein von Salmonella spp. und einige Shigella spp. SS-Agar ist ein mäßig selektives Medium, in dem grampositive Bakterien durch Gallensalze, Brillantgrün und Natriumcitrat gehemmt werden. Salmonella Shigella (SS) -Agar ist hochselektiv für Salmonellenarten, hemmt jedoch einige Shigella-Stämme. Es wurde entwickelt, um die Differenzierung von Laktose- und Nicht-Laktose-Fermentern aus klinischen Proben, vermuteten Lebensmitteln und anderen solchen Proben zu unterstützen.
Prinzip von SS-Agar
Salmonella Shigella Agar besteht aus Gallensalzen, Natriumcitrat, Brillantgrün, enzymatischem Aufschluss von Casein, Rindfleischextrakt, enzymatischem Aufschluss von tierischem Gewebe, Thiosulfat, Eisencitrat, neutralem Rot und Agar. Die Aufnahme von Gallensalzen, Natriumcitrat und Brillantgrün dient zur Hemmung grampositiver, coliformer Organismen und hemmt das Schwärmen von Proteus spp., während Salmonella spp. wachsen. Rindfleischextrakt, enzymatischer Aufschluss von Kasein und enzymatischer Aufschluss von tierischem Gewebe liefern Stickstoff-, Kohlenstoff- und Vitaminquellen, die für das Wachstum des Organismus erforderlich sind. Laktose dient als Kohlenhydratquelle in Salmonella Shigella Agar. Die Differenzierung von magensaftresistenten Organismen wird durch den Einbau von Lactose in das Medium erreicht. Organismen, die Lactose fermentieren, produzieren Säure, die in Gegenwart des neutralen roten Indikators zur Bildung von rot / rosa Kolonien führt. Laktose-Nichtfermenter bilden farblose Kolonien. Natriumthiosulfat und Eisencitrat ermöglichen den Nachweis von Schwefelwasserstoff durch die Produktion von Kolonien mit schwarzen Zentren. Neutrales Rot wird in Gegenwart eines sauren pH-Werts rot und zeigt so, dass eine Fermentation stattgefunden hat.
Zusammensetzung von SS-Agar
Inhaltsstoffe | Gms/Liter |
Lactose | 10.0 |
Gallensalze nein.3 | 8.5 |
Natriumcitrat | 8.5 |
Natriumthiosulfat | 8.5 |
Rindfleisch-Extrakt | 5.0 |
Proteosepepton | 5.0 |
Eisencitrat | 1.0 |
Leuchtendes Grün | 0.00033 |
Neutrales Rot | 0.025 |
Agar | 13.5 |
Endgültiger pH-Wert 7.0 +/- 0.2 bei 25ºC.
Herstellung von SS-Agar
- Suspendieren Sie 60 g des Mediums in einem Liter entionisiertem oder destilliertem Wasser.
- Gut mischen.
- Unter häufigem Rühren erhitzen und eine Minute kochen lassen.
- Medien nicht autoklavieren.
- In Teller gießen.
- Den Agar erstarren lassen und im Kühlschrank aufbewahren (Einfrieren vermeiden). Vorbereitete Kulturmedien können mindestens eine Woche im Kühlschrank aufbewahrt werden.
Ergebnisinterpretation von SS-Agar
Organismen | Ergebnis |
Shigella | Klar, farblos, transparent |
Escherichia coli | Klein, rosa bis rot |
Enterobacter, Klebsiella | Größer als E.coli, schleimig, blass, undurchsichtig creme bis rosa |
Salmonellen | Farblos, transparent, mit einem schwarzen Zentrum, wenn H2S produziert wird |
Proteus | Farblos, mit schwarzem Zentrum |
Verwendung von SS-Agar
- Es wird als selektives und differentielles Medium zur Isolierung von Salmonellen und einigen Shigella-Arten aus klinischen und nichtklinischen Proben verwendet.
- Dieses Medium wird nicht zur Primärisolierung von Shigellen empfohlen.
- Es wurde auch entwickelt, um die Unterscheidung von Laktose- und Nicht-Laktose-Fermentern aus klinischen Proben, vermuteten Lebensmitteln und anderen derartigen Proben zu unterstützen.
Einschränkungen von SS-Agar
- Der Einbau von Brillantgrün in dieses Medium macht es hochselektiv und es wurde gezeigt, dass es das Wachstum einiger Shigellen hemmt.
- Die Gallensalze können mit der Zeit kristallisieren. Sie erscheinen als kleine spinnenartige Blätterteigkugeln innerhalb des Mediums und beeinträchtigen die Leistung des Mediums nicht.
- Einige Shigellenstämme, wie Shigella sonnei und S. dysenteriae serovar 1, können Laktose relativ langsam fermentieren, und die Kolonien wechseln nach 2-tägiger Kultivierung in laktosefermentierende Kolonien.
- Auf Salmonella-Shigella-Agar können einige nicht pathogene Organismen wachsen.
- Es wird empfohlen, zur vollständigen Identifizierung biochemische, immunologische, molekulare oder massenspektrometrische Tests an Kolonien aus Reinkultur durchzuführen.