M13 Phage Library Construction Service
Creative Biolabs on kiistaton edelläkävijä ja innovatiivinen vasta-aineiden suunnittelun ja valmistuksen tutkija, joka on luonut täyden valikoiman asiantuntijapalveluita, jotka perustuvat eksklusiivisiin phage display-teknologioihimme. Niistä Creative Biolabs on ylpeä erinomaisesta M13 phage – kirjastojen rakentamispalvelustamme, joka voi tuottaa korkealaatuisia kirjastoja asiakkaillemme ympäri maailmaa.
vuonna 1985 syntynyt phage display on nopea, luotettava ja kätevä tapa rakentaa suuria peptidikirjastoja ja tarjoaa suoraviivaisen lähestymistavan yksilöllisten kloonien eristämiseen ja levittämiseen halutuilla ominaisuuksilla tehokkaan biopanningin avulla. Tämä tekniikka edistää erilaisia tutkimus -, lääketieteen ja teollisuuden sovelluksia, kuten vasta-aineiden löytäminen ja suunnittelu, epitope kartoitus, lääkekehitys, rokotteiden suunnittelu, ja niin edelleen. Toisin kuin perinteisessä hybridoomamenetelmässä, faagitutkimus on osoittanut poikkeuksellisen vetovoimansa monoklonaalisten vasta-aineiden löytämisessä helpon käsittelyn, korkean hyötysuhteen, isäntäeläinten monipuolisten valintojen ja immunogeenisuusriippumattomuuden ansiosta.
monista nykyisin käytössä olevista phage-ajoneuvoista M13 filamenttifagi on aina ollut suosituin vaihtoehto ja laajasti käytetty erilaisissa tutkimuksissa. M13 on yksi E: n bakteriofagi. tyypillinen pitkän sauvan näköinen coli, joka sisältää yhden juosteen DNA: n (6407 bp) genomin. Viruksen Turkki koostuu viidestä eri kapsidiproteiinista, duurikapsidista pVIII (2700 kopiota) ja neljästä mollikapsidista (toisessa päässä pIII ja pVI ja toisessa päässä pVII ja pIX). Toisin kuin T4 ja T7, M13 on lysogeeninen faagi, joka kerääntyy periplasmaan ja erittyy ulos bakteerikalvosta aiheuttamatta isäntälyysiä.
M13: n moninaiset kapsidiproteiinit tarjoavat kattavia näyttövalintoja, joilla voidaan esittää erilaisia peptidejä ja proteiineja, joilla on tunnusomaisia ominaisuuksia. Kaikilla viidellä capsidilla on onnistuneesti esitelty ulkomaisia domain-kirjastoja, joista jokainen tekee ainutlaatuisen vektorin eri ominaisuuksille. Useimmissa tapauksissa pIII ja pVIII ovat kuitenkin suositeltavia valintoja M13-phage-näytölle.
- pVIII-fuusionäyttö: pääkapsidina, jossa on 2700 kopiota per faagi, pVIII ympäröi virushiukkasta piikkimäisinä ulokkeina. Pviii: n n-terminaaliset fuusiot mahdollistavat lyhyiden, alle 9 aminohapon peptidien tiheyden näyttämisen, koska suuret insertiot saattavat keskeyttää faagikokoonpanon. PVIII-näyttöä suositellaan silloin, kun tarvitaan massiivisia näyttökopioita, kuten aviditeettiarviota, proteiinin ja proteiinin yhteisvaikutuksia ja immunologisia määrityksiä.
- pIII-fuusionäyttö: virionin toisessa päässä on 4-5 kopiota, pIII osallistuu infektion aikana isäntäsidontaprosessiin. pIII kestää suuria peptidi-ja proteiinilisäyksiä, mutta yleensä pienellä ilmentymisnopeudella. Siksi PIII-Näytön käyttäminen sopii parhaiten korkean affiniteetin valintaan panorointiprosessin aikana. PIII: ssä esitetyt suuret natiivit vasta-ainekirjastot on osoitettu tehokkaaksi lähestymistavaksi tuottaa erittäin spesifisiä ja affiniteettisia vasta-ainekandidaatteja, jotka kohdistuvat erilaisiin antigeeneihin.
- muut näyttövektorit: pviii: ta ja pIII: tä lukuun ottamatta voidaan vaihtoehtona hyödyntää myös muita kapsideja. Minor capsid pVI pystyy esittämään fuusioproteiineja C-päätepisteessään, mikä tekee siitä käyttökelpoisen cDNA-kirjastojen näyttämiseen. pXI ja pVII esiin myös lupaavina ajoneuvoina niiden signaalijakson riippumattomuuden, korkean palautumisasteen sekä korkean valintatehokkuuden vuoksi, mikä viittaa suureen potentiaaliin kaksinkertaiselle sivustonäytölle.
vuosien omistautuminen ja kertyminen tällä alalla, Creative Biolabs on jatkuvasti kehittää ja parantaa huippuluokan phage näyttö teknologioita ja tarjoaa korkealaatuista teknistä tukea maailmanlaajuisille asiakkaillemme. Patenttialustojen ja tarkkojen protokollien perusteella Creative Biolabsin tutkijat ovat onnistuneesti rakentaneet moitteettomia phage-näyttökirjastoja, jotka ovat erilaisia (mukaan lukien vasta-aine, peptidi, cDNA, proteiiniteline jne.) ja eristetyt spesifiset kloonit, joilla on riittävät ominaisuudet. Olemme iloisia voidessamme tarjota näitä integroituja palveluja M13 phage display kirjastot sekä kymmeniä premade vasta kirjastot parhaiten helpottaa asiakkaidemme tutkimusprojekteja.
Kuva 1. Rihmamaisten faagien elinkaari. (Huang, Bishop-Hurley and Cooper 2012)
Reference
- Huang, J. X., Bishop-Hurley, S. L. and Cooper, M. A. (2012) ”Development of anti-infectives using phage display: biological agents against bacteries, viruses, and parasites”, Antimicrobial agents and chemotherapy, 56(9), 4569-4582.
kaikki listatut räätälöidyt palvelut & tuotteet on tarkoitettu Vain tutkimuskäyttöön, ei farmaseuttiseen, diagnostiseen, terapeuttiseen tai In vivo-ihmiskäyttöön.