M13 Fago Biblioteca Servizio di costruzione

Come precursore indiscusso ed esploratore innovativo nel campo dell’ingegneria e della produzione di anticorpi, Creative Biolabs ha stabilito una gamma completa di servizi professionali basati sulle nostre esclusive tecnologie di visualizzazione dei fagi. Tra questi, Creative Biolabs è orgogliosa del nostro eccezionale servizio di costruzione di librerie di fagi M13 in grado di generare librerie di alta qualità per i nostri clienti in tutto il mondo.

Nato nel 1985, phage display è un metodo veloce, affidabile e conveniente per costruire grandi librerie di peptidi e offre un approccio semplice per isolare e propagare cloni unici con proprietà desiderate attraverso biopanning ad alta efficienza. Questa tecnologia contribuisce a varie applicazioni di ricerca, mediche e industriali, come la scoperta e l’ingegneria degli anticorpi, la mappatura degli epitopi, lo sviluppo di farmaci, la progettazione di vaccini e così via. Contrariamente al metodo convenzionale dell’ibridoma, l’esposizione del fago ha dimostrato la sua attrattiva eccezionale nel campo della scoperta dell’anticorpo monoclonale, dovuto le proprietà di manipolazione facile, di alta efficienza, delle diverse scelte degli animali ospiti e dell’indipendenza di immunogenicità.

Tra molti veicoli di fagi attualmente in applicazione, il fago filamentoso M13 è sempre stato l’opzione più popolare e ampiamente utilizzato in vari tipi di ricerca. M13 è un modello batteriofago di E. coli con un tipico aspetto asta lunga contenente un singolo filamento DNA (6407 bp) genoma. Il mantello virale è composto da cinque diverse proteine del capside, il capside maggiore pVIII (2700 copie) e quattro capsidi minori (pIII e pVI ad un’estremità mentre pVII e pIX all’altra estremità). A differenza di T4 e T7, M13 è fago lisogenico che è assemblato nel periplasma e secreto dalla membrana batterica senza causare lisi ospite.

Le proteine multiple del capside di M13 forniscono le scelte complete dell’esposizione che possono essere impiegate per visualizzare vari peptidi e proteine con le caratteristiche distintive. Tutti e cinque i capsid hanno esposto con successo librerie di domini stranieri, ognuna delle quali rende un vettore unico per caratteristiche diverse. Tuttavia, nella maggior parte dei casi, pIII e pVIII sono le scelte preferite per la visualizzazione dei fagi M13.

• Esposizione di fusione del pVIII: Come il capside principale con 2700 copie per fago, il pVIII avvolge la particella virale come sporgenze appuntite. Le fusioni del N-terminale a pVIII permettono alla visualizzazione ad alta densità dei peptidi brevi di meno di 9 amminoacidi perché le grandi inserzioni potrebbero interrompere l’assemblea del fago. Il display del pVIII è raccomandato quando sono necessarie copie massicce del display, come la valutazione dell’avidità, le interazioni proteina-proteina e i test immunologici.
• pIII-fusion display: Situato su un’estremità del virione con 4-5 copie, pIII è coinvolto nel processo di associazione dell’ospite durante l’infezione. pIII può sopportare le grandi inserzioni della proteina e del peptide ma solitamente con il tasso basso di espressione. Pertanto, l’utilizzo del display pIII è più appropriato per la selezione ad alta affinità durante il processo di panning. Le grandi biblioteche native dell’anticorpo presentate su pIII sono state provate come approccio potente generare i candidati altamente specifici e dell’anticorpo di affinità che mirano ad una varietà di antigeni.
• Altri vettori di visualizzazione: ad eccezione di pVIII e pIII, altri capsid possono anche essere sfruttati come alternativa. Il capside minore pVI può esibire le proteine di fusione al suo C-termine che lo rende suscettibile per la visualizzazione delle librerie di cDNA. pXI e pVII emergono anche come veicoli promettenti per la loro indipendenza dalla sequenza del segnale, l’alto tasso di recupero e l’elevata efficienza di selezione, suggerendo un grande potenziale per la visualizzazione a doppio sito.

Con anni di dedizione e accumulo in questo particolare campo, Creative Biolabs ha costantemente sviluppato e migliorato le tecnologie di visualizzazione dei fagi all’avanguardia fornendo al contempo un supporto tecnico di alta qualità ai nostri clienti in tutto il mondo. Sulla base delle nostre piattaforme di brevetto e protocolli precisi, i ricercatori di Creative Biolabs hanno creato con successo librerie di visualizzazione dei fagi impeccabili di diversi tipi (tra cui anticorpi, peptidi, cDNA, scaffold proteici, ecc.) e cloni specifici isolati con proprietà adeguate. Siamo lieti di offrire questi servizi integrati di librerie di visualizzazione dei fagi M13 e dozzine di librerie di anticorpi premade per facilitare al meglio i progetti di ricerca dei nostri clienti.

Fig 1. Il ciclo di vita dei fagi filamentosi. (Huang, Bishop-Hurley e Cooper 2012)

Riferimento

1. Huang, JX, Bishop-Hurley, SL e Cooper, MA(2012) ‘Sviluppo di anti-infettivi che utilizzano la visualizzazione dei fagi: agenti biologici contro batteri, virus e parassiti’, Agenti antimicrobici e chemioterapia, 56 (9), 4569-4582.

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