Service de construction de bibliothèques de phages M13
Précurseur incontesté et explorateur innovant dans le domaine de l’ingénierie et de la fabrication d’anticorps, Creative Biolabs a établi une gamme complète de services professionnels basés sur nos technologies d’affichage de phages exclusives. Parmi eux, Creative Biolabs est fier de notre service exceptionnel de construction de bibliothèques de phages M13 qui peut générer des bibliothèques de haute qualité pour nos clients du monde entier.
Né en 1985, l’affichage des phages est une méthode rapide, fiable et pratique pour construire de grandes bibliothèques peptidiques et offre une approche simple pour isoler et propager des clones uniques aux propriétés souhaitées grâce à un biopannage très efficace. Cette technologie contribue à diverses applications de recherche, médicales et industrielles, telles que la découverte et l’ingénierie des anticorps, la cartographie des épitopes, le développement de médicaments, la conception de vaccins, etc. Contrairement à la méthode conventionnelle d’hybridome, l’affichage des phages a démontré son attrait exceptionnel dans le domaine de la découverte d’anticorps monoclonaux, en raison des propriétés de manipulation facile, de grande efficacité, de choix variés d’animaux hôtes et d’indépendance d’immunogénicité.
Parmi les nombreux véhicules à phages actuellement en application, le phage filamenteux M13 a toujours été l’option la plus populaire et largement utilisée dans divers types de recherche. M13 est un bactériophage modèle de E. coli avec une apparence typique de tige longue contenant un génome d’ADN simple brin (6407 pb). Le manteau viral est composé de cinq protéines de capside différentes, la capside majeure pVIII (2700 copies) et quatre capsides mineures (pIII et pVI à une extrémité tandis que pVII et pIX à l’autre extrémité). Contrairement à T4 et T7, M13 est un phage lysogène qui est assemblé dans le périplasme et sécrété hors de la membrane bactérienne sans provoquer de lyse de l’hôte.
Les multiples protéines de capside de M13 offrent des choix d’affichage complets qui peuvent être utilisés pour afficher une variété de peptides et de protéines aux caractéristiques distinctives. Les cinq capsid ont présenté avec succès des bibliothèques de domaines étrangers, chacune constituant un vecteur unique pour différentes fonctionnalités. Cependant, dans la plupart des cas, pIII et pVIII sont les choix préférés pour l’affichage des phages M13.
- pVIII – affichage de fusion: En tant que capside principale avec 2700 copies par phage, pVIII enveloppe la particule virale sous forme de protubérances hérissées. Les fusions N-terminales à pVIII permettent l’affichage à haute densité de peptides courts inférieurs à 9 acides aminés car de grandes insertions pourraient interrompre l’assemblage des phages. L’affichage pVIII est recommandé lorsque des copies d’affichage massives sont nécessaires, telles que l’évaluation de l’avidité, les interactions protéine-protéine et les tests immunologiques.
- Affichage pIII-fusion: Situé à une extrémité du virion avec 4 à 5 copies, le pIII est impliqué dans le processus de liaison de l’hôte pendant l’infection. pIII peut supporter de grandes insertions de peptides et de protéines, mais généralement avec un faible taux d’expression. Par conséquent, l’utilisation de l’affichage pIII est la plus appropriée pour la sélection à haute affinité pendant le processus de panoramique. De grandes banques d’anticorps natifs présentées sur pIII ont été prouvées comme une approche puissante pour générer des candidats anticorps hautement spécifiques et d’affinité ciblant une variété d’antigènes.
- Autres vecteurs d’affichage : À l’exception de pVIII et pIII, d’autres capsides peuvent également être exploitées comme alternative. La capside mineure pVI est capable de présenter des protéines de fusion à son extrémité C, ce qui la rend apte à afficher des bibliothèques d’ADNc. pXI et pVII apparaissent également comme des véhicules prometteurs pour leur indépendance de séquence de signaux, leur taux de récupération élevé ainsi que leur efficacité de sélection élevée, suggérant un grand potentiel d’affichage sur deux sites.
Avec des années de dévouement et d’accumulation dans ce domaine particulier, Creative Biolabs a constamment développé et amélioré des technologies d’affichage de phages de pointe tout en fournissant un support technique de haute qualité à nos clients du monde entier. Sur la base de nos plates-formes de brevets et de protocoles précis, les chercheurs de Creative Biolabs ont réussi à constituer des bibliothèques d’affichage de phages impeccables de divers types (anticorps, peptide, ADNc, échafaudage protéique, etc.).) et des clones spécifiques isolés aux propriétés adéquates. Nous sommes heureux d’offrir ces services intégrés de bibliothèques d’affichage de phages M13 ainsi que des dizaines de bibliothèques d’anticorps préfabriqués pour faciliter au mieux les projets de recherche de nos clients.
Fig 1. Le cycle de vie des phages filamenteux. (Huang, Bishop-Hurley et Cooper 2012)
Référence
- Huang, J.X., Bishop-Hurley, S.L. et Cooper, M.A. (2012) « Développement d’anti-infectieux utilisant l’affichage des phages: agents biologiques contre les bactéries, les virus et les parasites », Agents antimicrobiens et chimiothérapie, 56 (9), 4569-4582.
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