M13 Fágkönyvtár építési szolgáltatás

mint vitathatatlan előfutára és innovatív felfedezője az antitest-tervezés és gyártás területén, a Creative Biolabs professzionális szolgáltatások teljes skáláját hozta létre exkluzív fágmegjelenítési technológiáinkon alapulva. Közülük a Creative Biolabs büszke kiemelkedő M13 fágkönyvtár-építési szolgáltatásunkra, amely kiváló minőségű könyvtárakat hozhat létre ügyfeleink számára a világ minden tájáról.

az 1985-ben született phage display gyors, megbízható és kényelmes módszer nagy peptidkönyvtárak létrehozására, és egyszerű megközelítést kínál a kívánt tulajdonságokkal rendelkező egyedi klónok izolálására és szaporítására a nagy hatékonyságú biopanning révén. Ez a technológia hozzájárul a különböző kutatási, orvosi és ipari alkalmazásokhoz, mint például az ellenanyagok felfedezése és tervezése, az epitóp feltérképezése, a gyógyszerfejlesztés, a vakcina tervezése és így tovább. A hagyományos hybridoma módszerrel ellentétben a fágmegjelenítés bizonyította kivételes vonzerejét a monoklonális antitest-felfedezés területén, a könnyű kezelhetőség, a nagy hatékonyság, a gazdaállatok változatos választéka és az immunogenitás függetlensége miatt.

a jelenleg alkalmazott fágjárművek közül az M13 fonalas fág mindig is a legnépszerűbb lehetőség volt, és széles körben használták a különféle típusú kutatásokban. Az M13 az egyik sablon bakteriofág E. coli tipikus hosszú rúd megjelenéssel, amely egyszálú DNS-t (6407 bp) tartalmaz Genom. A vírusréteg öt különböző kapszidfehérjéből áll, a pviii fő kapszidból (2700 kópia) és négy kisebb kapszidból (pIII és pVI az egyik végén, míg pVII és pIX a másik végén). A T4-től és a T7-től eltérően az M13 lizogén fág, amely a periplazmában összegyűlik, és a bakteriális membránból kiválasztódik anélkül, hogy a gazdaszervezet lízisét okozná.

az M13 több kapszidfehérje átfogó megjelenítési lehetőségeket kínál, amelyek felhasználhatók különféle peptidek és fehérjék megjelenítésére, amelyek megkülönböztető tulajdonságokkal rendelkeznek. Mind az öt kapszid sikeresen kiállított külföldi domain könyvtárakat, amelyek mindegyike egyedi vektort készít a különböző funkciókhoz. A legtöbb esetben azonban a pIII és a pVIII az előnyben részesített választás az M13 fágkijelzéshez.

• pVIII-fúziós kijelző: mivel a fő kapszid fágonként 2700 kópiával rendelkezik, a pVIII tüskés kiemelkedésekként borítja a vírusrészecskét. Az N-terminális fúziók a pVIII-hoz lehetővé teszik a 9 aminosavnál kisebb rövid peptidek nagy sűrűségű megjelenítését, mivel a nagy inszerciók megszakíthatják a fágegységet. A pVIII kijelzés akkor ajánlott, ha masszív megjelenítési másolatokra van szükség, például aviditás-értékelésre, fehérje-fehérje kölcsönhatásokra és immunológiai vizsgálatokra.
• pIII-fúziós kijelző: a virion egyik végén található, 4-5 példányban, a pIII részt vesz a gazdaszervezet-kötési folyamatban a fertőzés során. a pIII képes elviselni a nagy peptid és fehérje inszerciókat, de általában alacsony expressziós sebességgel. Ezért a pIII kijelző használata a legmegfelelőbb a nagy affinitású kiválasztáshoz a pásztázási folyamat során. A pIII-n bemutatott nagy natív antitestkönyvtárak hatékony megközelítésnek bizonyultak a nagyon specifikus és affinitású antitest jelöltek előállításához, amelyek különböző antigéneket céloznak meg.
• egyéb megjelenítési Vektorok: a pVIII és pIII kivételével más kapszidokat is ki lehet használni alternatívaként. A pVI kisebb kapszid képes fúziós fehérjéket kiállítani a C-terminálisán, ami alkalmassá teszi a cDNS könyvtárak megjelenítésére. a PXI és a pVII szintén ígéretes járművekként jelennek meg a jelsorozat függetlensége, a magas visszanyerési arány és a nagy kiválasztási hatékonyság miatt, ami nagy lehetőséget jelent a kettős helyszíni megjelenítésre.

a Creative Biolabs évek óta elkötelezetten és felhalmozva ezen a területen folyamatosan fejleszti és fejleszti az élvonalbeli fágmegjelenítési technológiákat, miközben magas színvonalú technikai támogatást nyújt világszerte ügyfeleinknek. Szabadalmi platformjainkra és precíz protokolljainkra alapozva a Creative Biolabs kutatói sikeresen építettek ki kifogástalan fágkijelző könyvtárakat különböző típusokból (beleértve az antitesteket, peptideket, cDNS-eket, protein állványzatot stb.) és izolált specifikus klónok megfelelő tulajdonságokkal. Örömmel kínáljuk az M13 fág kijelző könyvtárak ezen integrált szolgáltatásait, valamint több tucat előre elkészített antitest könyvtárat, hogy a lehető legjobban megkönnyítsük ügyfeleink kutatási projektjeit.

1.ábra. A fonalas fágok életciklusa. (Huang, Bishop-Hurley and Cooper 2012)

hivatkozás

1. Huang, J. X., Bishop-Hurley, SL and Cooper, ma (2012) ‘fertőzésellenes szerek fejlesztése fágkijelzővel: baktériumok, vírusok és paraziták elleni biológiai anyagok’, antimikrobiális szerek és kemoterápia, 56(9), 4569-4582.

az összes felsorolt testreszabott szolgáltatás & termék csak kutatási célokra szolgál, nem gyógyszerészeti, diagnosztikai, terápiás vagy bármilyen in vivo emberi felhasználásra.