Come trovare i funghi nei campioni di istologia-Vai per GMS!

L’argento della metenamina di Gomori (GMS) è un’altra macchia speciale comunemente usata nel laboratorio di istologia.

Cosa macchia GMS?

(1) Funghi

GMS è probabilmente meglio conosciuto per la colorazione di organismi fungini. I funghi sono generalmente relativamente grandi e morfologicamente diversi e possono verificarsi nei tessuti in varie forme :ph, spore endosporulanti, lieviti in erba o una combinazione di queste forme.

Caratteristiche classiche

Alcune infezioni fungine sono causate da una specie di fungo con morfologia molto caratteristica e possono quindi essere diagnosticate relativamente facilmente su sezioni macchiate di ematossilina ed eosina (H &E) quando si osservano le loro caratteristiche classiche. Questi includono specie di Cryptococcus, così come altri come Histoplasma, Blastomyces, Coccidiomyces, Rhinosporidium e Prototheca.

Quando non possiamo fare affidamento solo sull’istologia

Altre infezioni, tuttavia, possono essere dovute a una delle molte specie di un genere. Dal momento che questi sembrano tutti simili nelle sezioni di tessuto, l’istologia da sola non può identificare definitivamente le specie coinvolte, ma può almeno aiutare a categorizzare ampiamente la malattia fungina. Questo è il caso di aspergillosi e candidosi, per esempio.

Mi sembrano tutti uguali

Inoltre, alcune infezioni possono anche essere causate da un certo numero di funghi appartenenti a generi diversi. Questi diversi funghi possono apparire simili all’interno del tessuto, quindi l’organismo esatto non può essere definitivamente identificato. L’esame delle sezioni di H&E-macchiato può almeno contribuire a categorizzare ampiamente la malattia fungina quali la feohyphomycosis o la zigomicosi.

Facile e veloce

La valutazione microscopica dei tessuti è un modo semplice e veloce per identificare gli organismi fungini. Queste varie forme possono essere spesso identificate in sezioni di tessuto H&E-macchiato. Tuttavia, sebbene H&E sia la macchia preferita per identificare i funghi naturalmente pigmentati (e i nuclei delle cellule simili a lieviti), non è consigliabile utilizzare questa macchia in isolamento per diagnosticare le infezioni fungine. Questo perché alcuni funghi possono essere facilmente trascurati in sezioni H&E-macchiato, soprattutto se non naturalmente pigmentate, o se sono presenti in basso numero. Può anche essere difficile differenziare i funghi scarsamente macchiati dai componenti del tessuto in sezioni H&E-macchiate. Inoltre, l’identificazione fungina può essere difficile se le caratteristiche classiche sono assenti o alterate – l’ultima delle quali può verificarsi in associazione con la terapia fungina.

Quindi, quando si trovano prove istologiche di infiammazione granulomatosa o granulomi effettivi nei tessuti, vengono generalmente eseguite macchie speciali per verificare la presenza di organismi infettivi che possono causare tali cambiamenti, vale a dire funghi e batteri acidi veloci.

(2) Altri organismi

Il GMS può essere una macchia utile per identificare anche altri organismi:

Alghe Come Prototheca spp. andChlorella spp.
Pneumocystis spp. Colora la parete della cisti
Organismi microsporidiani Colora il loro mantello di spore
Alcuni organismi batterici Nocardia spp., Mycobacterium spp., e batteri non filamentosi con capsule di polisaccaridi, come asKlebsiella pneumoniae andStreptococcus pneumoniae.

Principi generali della macchia

GMS è una macchia di acido cromico, bisolfito di sodio.

La fase iniziale della macchia GMS è simile a quella della macchia periodica acid-Schiff (PAS) in quanto utilizza l’acido cromico come agente ossidante. Durante questa fase, l’ossidazione dell’acido cromico forma aldeidi dai componenti del mucopolisaccaride della parete cellulare fungina.

Il tessuto viene quindi trattato con una soluzione di nitrato d’argento di metenamina. Durante questa fase, i gruppi aldeidici reagiscono con il nitrato d’argento, riducendolo a argento metallico, che appare nero.

In contrasto con la macchia PAS, tuttavia, l’acido cromico è un agente ossidante più forte dell’acido periodico e ossida ulteriormente alcuni gruppi aldeidici, producendo una sostanza che non può reagire con ioni d’argento. Lo sfondo collageno nei tessuti quindi non macchia.

Quando si utilizza una soluzione di colore verde chiaro, gli elementi fungini si macchiano di nero con margini netti e un centro sgombro, su uno sfondo di tessuto verde chiaro.

GMS versus PAS

GMS e PAS sono le due macchie più comuni utilizzate per controllare la presenza di funghi nei tessuti. Entrambi sono considerati macchie fungine “ad ampio spettro”, poiché la maggior parte dei funghi può essere facilmente vista con entrambe le macchie.

Un vantaggio di GMS è che produce un migliore contrasto di colorazione nelle sezioni dei tessuti e rileva anche funghi degenerati e morti che potrebbero non essere rilevati dalla macchia PAS. Questo rende GMS una scelta migliore per lo screening generale dei tessuti per l’infezione fungina.

Chi usa la macchia GMS?

Questa macchia è ampiamente utilizzata sia per scopi diagnostici che di ricerca. Ad esempio, i ricercatori che studiano gli organismi fungini possono regolarmente esaminare sezioni macchiate di GMS per valutare alcuni elementi fungini nei tessuti di interesse.

Nei laboratori diagnostici, la colorazione del tessuto GMS viene spesso utilizzata in combinazione con colture microbiologiche per la diagnosi di infezioni fungine in persone e animali, poiché la presenza di organismi fungini nei tessuti indica un’infezione invasiva. Pertanto, i patologi useranno spesso questa macchia per aiutare a rispondere alle domande dopo aver esaminato le sezioni di routine H&E-stained che contengono cambiamenti suggestivi di infezione fungina.

In che modo GMS è più comunemente usato nel tuo laboratorio?

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Scritto da Nicola Parry

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