“基礎実用微生物学”©一般微生物学会の情報に基づく注意事項。
本作またはその他の微生物学の実用的な作業を開始する前に無菌技術を参照してください。
注ぐプレートでは、スープ培養からの少量の接種物をピペットでペトリ皿の中心に加えます。 その後、試験管またはボトル内の冷却されたがまだ溶融した寒天培地をペトリ皿に注ぐ。 皿はそれから穏やかに回るか、または(最初N-S、次にNW-SE、そしてNE-SW)、培養および媒体が完全に混合され、媒体が版を均等に覆うことを保障するために前後
Pourプレートを使用すると、表面と培地の両方で微生物が成長することができます。 コロニーのほとんどは培地内で成長し、サイズが小さく、合流する可能性があります。 表面上に成長するいくつかのコロニーは、縞板上のものと同じ大きさと外観のものです。
これらのプレートを使用して、様々な物質の抗菌効果を試験することができます。 詳細については、”抗菌作用の調査”を参照してください。
そうでなければ、このようなプレートはサンプル中の細菌の集団の調査の一部である可能性があります。 このようにして連続希釈を培養することにより、細菌試料の集団サイズの計算が可能になる。 接種物の希釈および容積、通常1cm3が既知であれば、cm3あたりのサンプルの生存数を決定することができる。 生存数は、cm3あたりの細菌または細菌の塊の数である。 選択された希釈は、30と100の別々の可算コロニーの間で生成する必要があります。 (標準的な手法も参照してください: 連続希釈を行う)
健康&安全性および技術上の注意事項
1溶融寒天のボトルを保管するには、50℃の水浴を使用してください。
2ボトル内の溶融寒天を水浴からの水で汚染しないように注意してください。 汚染を避けるために、
i水浴中の水が正しい深さにあること
iiボトルが直立していること
iiiボトルの外側が使用される前に拭き取られていること。
3均等に広げた注ぎ板では、板の基部を覆わなければならず、寒天は板の蓋に触れてはならず、表面は泡のない滑らかでなければならない。
4CLEAPSS Laboratory handbookセクション15.2.12は、注ぐプレートを作るいくつかの代替方法を提案し、その長所と短所を考慮します。
手順
パスツールピペットを使用した接種
常にピペットをできるだけ保持してください。
aは、接種物を含むボトルのキャップ/脱脂綿プラグを緩めます。
b滅菌パスツールのピペットを容器から取り出し、乳首を取り付けて右手に持ちます。
c接種物を含むボトル/試験管を左手で持ち上げます。
d右手の小指でキャップ/綿毛プラグを取り外します。
eはびん/試験管の首を炎にします。
fピペットの乳首球を非常にわずかに絞る。 ピペットをボトル/試験管に入れ、必要な量の培養物を作成します。 これにより泡および多分エーロゾルを引き起こすことができるのでそれが培養液にあった後ピペットの乳首の球根を絞らないで下さい。
gピペットを取り外し、ボトル/試験管のネックを再び炎にさらします。 キャップ/綿毛プラグを交換します。
hボトル/試験管をベンチまたはラックに置きます。
ペトリ皿の接種
ペトリ皿の蓋を右手で少し持ち上げ、ピペットをペトリ皿に挿入します。 穏やかに皿の中心に接種物の必須の容積を解放して下さい。 蓋を交換します。
bピペットを捨て鉢に入れる。
プレートを注ぐ
a水浴から滅菌溶融寒天のボトルを収集する(注1および2)。
bボトルを右手に持ってください。 左手の小指でキャップを取り外します。
dペトリ皿の蓋を左手で少し持ち上げ、滅菌溶融寒天をペトリ皿に注ぎます。 蓋を交換します。
eボトルの首を炎にし、キャップを交換します。
f皿を静かに動かして、培養液と培地を十分に混合し、培地がプレートを均等に覆うようにします注3。 最初のN-S、次にNW-SE、次にNE-SWの三つの方向に皿を動かすか、培地と接種物がよく混合され、皿の基部を覆うまで回転させます。
gプレートを凝固させます。
hテーププレートを閉じ、反転した位置でインキュベートする。
Webリンク
微生物学教師リソース
一般微生物学会–基本的な実用的な微生物学のソース、中等学校のための実験室技術と実用的な微生物学の優れたマニ
Microbiology online
MiSAC(Microbiology in Schools Advisory Committee)は一般微生物学会(上記参照)によって支援されており、ウェブサイトにはより多くの安全性情報と電子メールで助言を求めるためのリンクが含まれている。
(2011年9月アクセス)