Monoaminoksidase-En Inhibering og Assosiert Antioksidantaktivitet I Planteekstrakter Med Potensielle Antidepressive Virkninger

Abstrakt

Monoaminoksidase (MAO) katalyserer oksidativ deaminering av aminer og nevrotransmittere og er involvert i humørsykdommer, depresjon, oksidativt stress og bivirkninger farmakologiske reaksjoner. Dette arbeidet studerer inhiberingen av human MAO-A Av Hypericum perforatum, Peganum harmala og Lepidium meyenii, som rapporteres å forbedre og påvirke humør og mentale forhold. Deretter bestemmes antioxidantaktiviteten assosiert med INHIBERINGEN AV MAO i planteekstrakter for første gang. H. perforatum hemmet humant MAO-a, og ekstrakter fra blomster ga høyest hemming (IC50 på 63,6 µ/mL). Planteekstrakter ble analysert AV HPLC-DAD-MS og inneholdt pseudohypericin, hypericin, hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og flavonoider. Hyperforin hemmet ikke HUMANT MAO-A og hypericin var en dårlig hemmer av dette isoenzymet. Quercetin og flavonoider bidro betydelig TIL MAO – a-hemming. P. harmala – frøekstrakter sterkt hemmet MAO-A (IC50 på 49,9 µ / L), som er tusen ganger mer potent Enn h. perforatum-ekstrakter på grunn av innholdet av β-karbolinalkaloider (harmalin og harmin). L. meyenii root (maca) ekstrakter hemmet IKKE MAO-A. disse plantene kan utøve beskyttende handlinger relatert til antioksidanteffekter. Resultatene i dette arbeidet viser At p. harmala og h. perforatum ekstrakter utviser antioksidantaktivitet assosiert MED inhibering AV MAO (dvs.lavere produksjon AV H2O2).

1. Innledning

enzymet monoaminoksidase (MAO) metaboliserer xenobiotiske og endogene aminer og nevrotransmittere, inkludert serotonin, dopamin, noradrenalin, tyramin, tryptamin og nevrotoksinet MPTP . DET forekommer som TO isoenzymer, MAO-A OG MAO-B, som spiller en viktig rolle i sentralnervesystemet (CNS) og perifere organer. MAO-B er involvert i nevrodegenerative sykdommer OG MAO-A i psykiatriske tilstander og depresjon. Inhibitorer AV MAO-B er nyttige som nevrobeskyttende midler, mens inhibitorer AV MAO-A er effektive antidepressiva, selv om bruken av DEM kan utløse bivirkninger (f. eks. hypertensiv krise med matvarer som inneholder tyramin). På den annen side genererer oksidasjonen av biogene aminer og nevrotransmittere AV MAO-enzymer hydrogenperoksid (H2O2), oksygenradikaler og aldehyder, som er risikofaktorer for celleoksidativ skade. Derfor kan inhiberingen av MAO resultere i beskyttelse mot oksidativt stress og nevrotoksiner . Nylige undersøkelser har påpekt at plante-og matekstrakter kan hemme MAO-enzymer som resulterer i de ovennevnte biologiske effektene . PÅ den annen side, som et resultat AV MAO-inhibering, kan disse produktene være involvert i uønskede interaksjoner med andre urtepreparater, matvarer eller stoffer .

Hypericum perforatum L. (family Hypericaceae) (St. John ‘ S wort) er mye brukt til helsemessige formål, og deres produkter er kommersielt tilgjengelige som urter, nutraceuticals, te, tinkturer, juice, oljete macerates, phytopharmaceuticals og tilsetningsstoffer og kosttilskudd . H. perforatum er populært for behandling av mild og moderat depresjon . Det kan utløse uønskede farmakologiske interaksjoner med andre urter, narkotika eller mat . Dens evne til å lindre og forbedre humørsykdommer og depresjon tilskrives aktive forbindelser som utviser antidepressive egenskaper . Den mest aksepterte virkningsmekanismen er monoaminreopptakshemming, men ytterligere mekanismer, inkludert monoaminoksidasehemming og synergistiske effekter kan være involvert . Peganum harmala (familien Zygophyllaceae) og Lepidium meyenii (familien Brassicaceae) (maca) er planter med CNS-effekter og potensielle antidepressive handlinger . P. harmala, innfødt Fra Middelhavsregionen og Asia og utvidet Til Nord-Amerika områder, brukes som et multifunksjonshelsemiddel, inkludert CNS-lidelser. Preparater av denne planten kan utløse uønskede farmakologiske interaksjoner . L. meyenii er en spiselig plante fra de sentrale Andesene hvis røtter brukes som mat energizer og nutraceutical for å forbedre fysiske og mentale forhold og fruktbarhet . Formålet med dette arbeidet var å studere inhiberingen av HUMAN MAO-A ved ekstrakter Av H. perforatum, P. harmala og l. meyenii (maca) samt av deres aktive komponenter som ble identifisert og analysert AV HPLC-DAD-MS og deretter evaluere antioxidantaktiviteten som er spesielt forbundet med INHIBERINGEN AV MAO. Denne spesifikke antioksidantaktiviteten bestemmes for første gang i planteekstrakter.

2. Materialer Og Metoder

Hypericum perforatum l. planter samlet I Ciudad Real (Spania) ble tørket og separert i deler: blomster; topp antenne deler av anlegget inkludert forgrenede stengler og blader, men ingen blomster; og viktigste stammer (sentrale og nedre) og røtter. De ble malt og pulveret som ble brukt til prøvepreparering. Kommersielle urter og urte kosttilskudd (kapsler og tabletter) Av H. perforatum ble også kjøpt i lokale urtebutikker. Peganum harmala l. plante og frø ble samlet i Toledo (Spania). Lepidium meyenii (maca) både som pulver og kommersielle tabletter ble hentet Fra Peru og lokale butikker. Hypericin standard (>95% purity by HPLC) from HWI Analytik GMBH pharma solutions, hyperforin dicyclohexylammonium salt, quercetin, harmaline, harmine, catalase, clorgyline, 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine (TMB), and horseradish peroxidase (HRP) type II were purchased from Sigma-Aldrich.

2.1. Sample Preparation of Plant Extracts

Samples containing H. perforatum (i.e., plant parts, herbal preparation, capsules, or tablets) (500 mg) were homogenized in 10 mL of water/methanol (1 : 1) Ved å bruke En Ultra Turrax homogenisator, sentrifugert ved 10000 rpm for 10 min, og supernatanten ble samlet. Prosessen ble gjentatt to ganger med resten og de tre supernatantfraksjonene samlet, blandet og analysert AV HPLC som nevnt nedenfor. Etter tre påfølgende ekstraksjoner var utvinningen av hypericin og pseudohypericin høyere enn 97%. Prøver av L. meyenii (maca) (500 mg) og p. harmala frø (500 mg) ble homogenisert i henholdsvis 10 mL vann/metanol (1: 1) eller 10 mL 0,6 M perklorsyre : metanol (1 : 1) Ved å bruke En Ultra Turrax homogenisator, sentrifugert ved 10000 rpm for 10 min, og supernatanten ble samlet. Denne prosessen ble gjentatt to ganger med resten og de oppsamlede supernatanter ble blandet og analysert AV HPLC som nevnt nedenfor.

2.2. RP-HPLC Analyse Av Planteekstrakter

analysen Av h. perforatum ekstrakter ble utført AV RP-hplc MED UV diode array og fluorescens deteksjon ved hjelp AV EN HPLC 1050 (Agilent) kombinert med en 1100 diode array detector (DAD) (Agilent) og EN 1046a-fluorescens detektor. En 150 3,9 mm i.d., 4 µ, Nova-pak C18 kolonne (Vann) ble brukt til separasjon. Kromatografiske forhold var 50 mM ammoniumfosfatbuffer (pH 3) (buffer A) og 20% av a i acetonitril (buffer B). Gradienten ble programmert fra 0% (100% A) til 32% B på 8 min og 100% B på 10 min. Gjennomstrømningshastigheten var 1 mL / min, kolonnetemperaturen var 40°C, og injeksjonsvolumet var 20 µ. Påvisning av hypericiner ble utført ved absorbans ved 590 nm og fluorescens ved 236 nm for eksitasjon og 592 nm for utslipp. Konsentrasjonen av hypericin ble bestemt fra en kalibreringskurve for respons (absorbans ved 590 nm) versus konsentrasjon med oppløsninger laget i laboratoriet fra hypericin standard. Den samme responsfaktoren ble brukt på pseudohypericin, protohypericin og protopseudohypericin. Flavonoider og flavonoidglykosider ble analysert ved 265 nm og 355 nm og konsentrasjonen av quercetin ble bestemt ved 355 nm fra en kalibreringskurve av respons versus konsentrasjon. Hplc-fraksjonen som tilsvarer flavonoider og flavonoidglykosider (7 til 11 min) ble samlet ved suksessive injeksjoner Av h. perforatum-ekstrakt (urter) og, etter fordampning i vakuum, oppløst i 30% metanol og brukt TIL MAO-a-hemming. Phloroglucinols (hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og adhyperfirin) ble analysert ved 280 nm ved å bruke samme kolonne (Nova-pak C18) og forhold, men under isokratisk eluering med 20% av 50 mM ammoniumfosfatbuffer, pH 3 og 80% av acetonitril. Konsentrasjonen av disse forbindelsene ble bestemt fra en kalibreringskurve av hyperforin-standarden. Analysen av β-karbolinalkaloider I P. harmala og l. meyenii ble utført som tidligere beskrevet .

2.3. Identifikasjon Ved HPLC-ESI-Massespektrometri

Identifikasjon av forbindelser I H. perforatumekstrakter ble gjort VED HPLC-MS (elektrospray-negativ ionmodus) ved å bruke en 1200-serie HPLC-DAD koblet til en 6110 quadrupole-MS (Agilent). Kromatografisk separasjon ble utført på en kolonne med 150 2.1 mm I.d. Zorbax SB-C18 (5 µ) (Agilent Technologies). De kromatografiske forholdene var eluent A: maursyre (0,1%); B: maursyre (0,1%) i acetonitril; gradient: 0% til 70% b i 8 min og 100% b ved 10 min, strømningshastighet: 0,3 mL/min; : 40°C; masseområde: 50-700 e og kjeglespenning: 150 V. for identifisering av phloroglucinols (f.eks. hyperforin) ble separasjon gjort Ved Bruk av En Nova-pak c18 (4 µ) kolonne med samme eluenter og isokratisk eluering (eluent a, 20% og eluent b, 80%) ved en strømningshastighet på 0,7 ml/min og massespektra Registrert i negativ og positiv ionisering. Identifikasjon av forbindelser ble gjort på grunnlag av massespektra, UV-vis spektra (DAD) av kromatografiske topper, og coelution med standarder. β-Karboliner I P. harmala og l. meyenii ble identifisert som tidligere beskrevet .

2.4. Monoaminoksidase (MAO-A) Inhiberingsanalyser

MAO-analyser ble utført som andre steder . Kort fortalt ble membranproteinfraksjoner som inneholdt MAO-A (BD-Gentest) fortynnet til de ønskede konsentrasjoner i 100 mM kaliumfosfatbuffer (pH 7,4). En 0,2 mL reaksjonsblanding inneholdende 0,01 mg/mL protein og 0.25 mM kynuramin i 100 mM kaliumfosfat (pH 7,4) ble inkubert ved 37°C i 40 min. Etter inkubering ble reaksjonen stoppet ved tilsetning av 2 N NaOH (75@l), etterfulgt av tilsetning av 70% HClO4 (25 µ), og prøven ble sentrifugert (10000) i 10 minutter. Supernatanten (20 µ) ble injisert i HPLC og deamineringsproduktet av kynuramin (dvs. 4-hydroksykinolin) dannet under enzymatisk reaksjon bestemt VED rp-HPLC-diode array deteksjon ved 320 nm. En responskurve av areal versus konsentrasjon ble konstruert for å beregne konsentrasjonen av 4-hydroksykinolin. FOR å utføre analyser AV MAO-hemming ble alikvoter av ekstrakter fra planter eller kommersielle preparater eller i stedet rene forbindelser fortynnet og tilsatt til reaksjonsblandinger som inneholder kynuramin (0,25 mM) og MAO-a (0,01 mg/mL protein) i 100 mM kaliumfosfatbuffer (pH 7,4), med enzymatisk reaksjon og analyse utført som ovenfor, og sammenlignet med de tilsvarende kontrollene som inneholder løsningsmiddel. Standardhemmeren clorgylin ble brukt som positiv kontroll for hemming (>90% hemming ved 2,5 µ). Inkubasjoner ble utført i det minste i to eksemplarer fra forskjellige eksperimenter, OG IC50-verdiene ble beregnet ved Hjelp Av GraphPad Prism 4.0.

2.5. Bestemmelse Av Antioksidantaktivitet Assosiert Med Monoaminoksidasehemming (MAO)

Analyser (0,2 mL) av reaksjonsblandinger i 70 mM kaliumfosfatbuffer (pH 7,4), inneholdende 0,025 mg / mL MAO-a-protein og 0,25 mM kynuramin, ble inkubert ved 37°C i 40 minutter i fravær (kontrollanalyser) eller i nærvær av planteekstrakter. MAO-analyser ble også utført med klorgylin (25 µ), en KLASSISK hemmer AV MAO-A (positiv kontroll av hemming) eller katalaseenzym (100 µ/mL). Etter inkubasjonsperioden ble reaksjonsblandingen tilsatt aktivt kull (3,5 mg), blandet og filtrert (0,45 µ). Oppløsningen ble tilsatt med 20 µ av 10 mM tetrametylbenzidin (TMB) i 40% DMSO og 20 µ av pepperrotperoksidase (HRP) TYPE II (1 mg/mL), holdt i 5 minutter og tilsatt med 0,3 mL 0,5 M H2SO4 oppløsning. Absorbansen ved 450 nm ble målt FOR å bestemme TMB diimin, et gult produkt som følge av oksidasjon AV TMB VED HRP og H2O2 generert i oksidativ deaminering katalysert AV MAO. Oksydasjonen AV TMB i nærvær AV mao-hemmere ble sammenlignet med de tilsvarende kontrollene uten inhibitorer og passende emner viste fravær av forstyrrelser.

3. Resultater Og Diskusjon

Kommersielle preparater Av H. perforatum hemmet human MAO-A med lignende styrke: IC50-verdier på 142.3 ± 30.6 hryvnias / mL (urtepreparat), 193 ± 61 hryvnias/mL (kapsler) og 173 hryvnias 29 hryvnias/mL (tabletter) (Figur 1(a)). Når det gjelder planter, har H. perforatum-ekstrakter fra blomster den høyeste hemmingen (IC50 av 63.6 ± 9.4 µ/mL) etterfulgt av luftstammer og blader (IC50 143.6 ± 16.5 µ/mL), og den laveste i rotekstrakter(Figur 1 (b)). Utdrag Fra luftdelene Av H. perforatum ble analysert VED HPLC-DAD-ESI (elektrospray-negativ ionisering). De viste tilstedeværelsen av to store naftodiantroner identifisert som pseudohypericin og hypericin (Figur 2 (a) Og Tabell 1). Blomsterekstrakter hadde to ekstra forbindelser identifisert som protopseudohypericin og protohypericin. Fenoler og flavonoider florerte I h. perforatum ekstrakter (Figur 2 (b)). Klorogensyre og quercetinglykosidene rutin, hyperosid, isoquercitrin, miquelianin, acetyl hyperosid og quercitrin, samt fri quercetin og biapigenin, ble identifisert AV HPLC-DAD (ESI negativ ionisering) og DAD (Tabell 1). På den annen side inneholdt blomstekstrakter fire phloroglucinols (Figur 2 (c)) som ble identifisert AV HPLC-DAD-MS (ESI negativ og positiv ionisering) og DAD som hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og adhyperfirin (Tabell 1). Tilstedeværelsen av disse forbindelsene (Figur 3) i anlegget er i samsvar med andre resultater . Innholdet av hovedkomponentene ble bestemt AV HPLC(Tabell 2). Konsentrasjonen av pseudohypericin var høyere enn hypericin, mens protopseudohypericin og protohypericin var mindre forbindelser (0,4 µ/mg protopseudohypericin og 0.17 µ/mg protohypericin ble påvist i blomster). I planten ble det høyeste innholdet av hypericiner funnet i blomster med betydelig lave nivåer oppdaget i stengler og fravær i røtter. Hyperforin var svært rik på blomster (27,2 µ / mg), mens konsentrasjonen i kommersielle preparater varierte fra 0,36 til 2,4@g/mg. I blomster, adhyperforin (1.4 ± 0.07 µg/mg), hyperfirin (4.2 ± 0.02 µg/mg), og adhyperfirin (0.46 ą 0,02 µg/mg) dukket også opp. Flavonoider florerte I H. perforatum og de fleste av dem var quercetinglykosider (Figur 2 (b)) hvis tilstedeværelse var betydelig høyere i blomster enn i andre deler av planten. Innholdet av fritt quercetin i blomster var 2,0 µ / mg, mens et innhold på 6,7 µ / mg ble bestemt i kommersielle preparater.

(a)

(b)

(a)
(b))

Figur 1

Hemming av humant monoaminoksidase-A (MAO-A) ved ekstrakter av kommersielle preparater Av H. perforatum (a) (kapsler,■; tabletter, ▲; urter,▼), og ekstrakter fra ulike deler av planten (b) (blomster,∆; toppstammer,◊; hovedstammer (sentral),×; røtter,○). Signifikante forskjeller () blant ekstrakter ved en valgt konsentrasjon er angitt med forskjellige bokstaver.

(a) nm

(b) nm

(c) nm

(a) nm
(b) nm
(c) nm

Figure 2

HPLC chromatograms of extracts from H. perforatum flowers. (a) Detection of hypericins at 590 nm. 1: protopseudohypericin; 2: pseudohypericin; 3: protohypericin; and 4: hypericin. (b) Detection of phenols and flavonoids at 265 nm. 1: chlorogenic acid; 2: rutin; 3: hyperoside; 4: isokercitrin; 5: miquelianin; 6: acetyl hyperosid; 7: quercitrin; 8: quercetin; og 9: biapigenin. (c) Påvisning av phloroglucinols ved 280 nm. 1: hyperfirin, 2: adhyperfirin; 3: hyperforin; og 4: adhyperforin.

Figur 3

Strukturer av forbindelser identifisert I H. perforatum: hypericiner, quercetin og quercetin flavonoider og phloroglucinols(hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og adhyperfirin).

inhiberingen AV MAO-A Av H. perforatum ekstrakter indikerer forekomst av hemmere. Hypericiner, hyperforin og flavonoider er mulige bidragsytere til denne hemmingen og ble evaluert som hemmere (Figur 4). Hypericin hemmet MAO-a (IC50 av 35.5 ± 2.1 µ eller 17.9 µ/mL) (Figur 4(a)). Fra konsentrasjonen I Tabell 2 er hypericin en svak bidragsyter TIL MAO-hemming i h. perforatum-ekstrakter. Faktisk var det beregnede innholdet av hypericin ved IC50-verdi i analyser av blomsterekstrakt (dvs. 63,6 µ/mL) 0,1 µ / mL, som er lavt sammenlignet med IC50 med hypericin (17,9 µ/mL). Hyperforin hemmet IKKE MAO-A (Figur 4 (b)). Quercetin hemmet HUMANT MAO-A(Figur 4 (b)) med EN IC50-verdi på 11.1 ± 0.8 µ (dvs.3.36 µ/mL). Deretter var quercetin en bedre hemmer enn hypericin, selv om dens styrke fortsatt var lav for å forklare hele inhiberingen av ekstrakter. Det beregnede innholdet av quercetin VED IC50 i analyser av blomsterekstrakt var derfor 0,13 µ/mL, som er lavere ENN IC50 for quercetin (3,4 µ/mL). Når fraksjonen som tilsvarer quercetinglykosider og flavonoider(7-11 min, Figur 2 (b)) ble samlet inn AV RP-HPLC, hemmet DEN MAO-A (90% hemming ved 700 µ/mL ekstrakt) som indikerer et bidrag av disse forbindelsene TIL MAO-hemming I H. perforatum, sannsynligvis ved additive effekter. Deretter kan inhibering AV MAO-A oppstå fra komponenter som quercetin og relaterte flavonoider (dvs.quercetinglykosider) som er rikelig i planten. I Tillegg kan mindre forbindelser som ikke er identifisert her også bidra TIL MAO-hemming, da hovedforbindelser I Tabell 2 ikke forklarer hel hemming.

(a)

(b)

(a)
(b))

Figur 4

Hemming av humant monoaminoksidase-A (MAO-A) av aktive komponenter I H. perforatum: hypericin( a) og quercetin ( ■ ) og hyperforin ( ▲ ) (b).

Utdrag Fra P. harmala frø sterkt hemmet human MAO-A (Figur 5 (a)) som gir EN IC50-verdi på 49.9 ± 5.6 µ / L. Kromatografisk analyse indikerte at hemming skyldtes tilstedeværelse av β-karbolinalkaloider, harmalin og harmin, som ble identifisert AV HPLC-DAD-MS(Figur 5 (c)). Innholdet av disse alkaloider bestemt i frø var 48,5 mg / g for harmalin og 40,0 mg / g for harmin (dette betyr 2,4 ng/mL og 2,0 ng/mL, resp., i analyser VED IC50). Derfor var inhiberingsstyrken AV MAO-A av p. harmala frø 1274 ganger sterkere enn H. perforatum blomster. Som vist i Figur 5 (b) hemmet Ikke lepidium meyenii-rotekstrakter menneskelig MAO – A. L. meyenii (maca) er en populær plante Fra andesfjellene, hvis røtter i økende grad brukes til ernæringsmessige og medisinske egenskaper som energigivende og for å forbedre humør og seksuell ytelse . Tidligere rapporter har indikert at de inneholder alkaloider, inkludert β-karboliner som kan hemme MAO. Analyse av ekstrakter for β-karbolinalkaloider ga 25 µ/g (maca-pulver) og 11,7 µ/g (kapsler) med 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-karbolin-3-karboksylsyre som hovedforbindelse. Denne spesifikke β-carboline er ikke EN hemmer AV MAO-A .

(a)

(b)

(c)

(a)
(b)
(c))

Figur 5

hemming av humant monoaminoksidase-a (MAO-A) av ekstrakter Fra p. harmala-frø (a) og l. meyenii-rot (maca) (b) (kapsler, ▼ og pulver,■). (c) hplc kromatogram Av p. harmala frø ekstrakt som potently hemmet human MAO-A. Absorbans deteksjon ved 254 nm. Forbindelser identifisert er harmalin (m / z ved 215 (M + H)+, ved 375 nm) og harmin (m/z ved 213 (M + H)+, ved 245 og 322 nm).

MAO genererer hydrogenperoksid (H2O2) som er involvert i oksidativ celleskade og patologiske forhold . Deretter kan inhiberingen AV MAO resultere i spesifikke antioksidanthandlinger . For å studere antioksidantaktiviteten forbundet MED MAO-inhibering, ble eksperimenter designet i denne undersøkelsen som koblet AKTIVITETEN TIL MAO-A med oksidasjon av tetrametylbenzidin (TMB) ved pepperrotperoksidase (HRP) og H2O2 produsert under oksidativ deaminering katalysert AV MAO (Figur 6). H. perforatum og P. harmala ekstrakter som hemmet MAO-A som vist ovenfor sterkt redusert oksidasjon AV TMB. I motsetning Til Dette hadde l. meyenii root (maca) ekstrakter som ikke hemmet MAO en lav antioxidantaktivitet i denne analysen. Clorgyline som er en potent hemmer AV MAO-A sterkt redusert oksidasjon AV TMB når den brukes som en kontroll. Det samme skjedde med tilstedeværelsen av katalase i media som fjerner H2O2 generert AV MAO-A. derfor indikerer disse resultatene At h. perforatum og p. harmala ekstrakter ga spesifikke antioksidanthandlinger assosiert med en lavere produksjon AV H2O2 ved inhibering AV MAO.

Figur 6

Antioksidantaktivitet assosiert MED MAO-hemming i analyser koblingsaktivitet AV MAO – A med påfølgende oksidasjon av tetrametylbenzidin (TMB) i nærvær H2O2 generert i REAKSJONEN AV MAO, og pepperrot peroxidase (HRP). Grafen viser oksydasjonen AV TMB til diimin (absorbans ved 450 nm) i kontrollanalyser (100%), og i nærvær Av H. perforatum (urter og blomsterekstrakter, 800 µ / mL), p. harmala frøekstrakter (0,8@g / mL), L. meyenii rot (maca) ekstrakter (800 µ / mL), clorgylin (en standard hemmer AV MAO-A) (25 µ) og catalase (100 µ/mL). forskjeller () i forhold til kontroller.

h. perforatum forbedrer humørsykdommer og depresjon . Som vist her inneholder den forbindelser som hyperforin, hypericiner og flavonoider som er ansvarlige for antidepressive effekter (Figur 2 Og Tabell 2). Imidlertid er den spesifikke mekanismen for antidepressiv virkning ikke helt forstått. Den mest aksepterte mekanismen er inhibering av monoaminopptak . Noen studier tyder imidlertid på en kombinasjon av mekanismer og synergistiske effekter . P. harmala utøver mange biologiske og farmakologiske tiltak. Frøene deres brukes i økende grad til rekreasjonsformål på grunn av deres psykoaktive og nevroaktive effekter . Inhiberingen av human MAO-A er en etablert mekanisme for antidepressiv virkning . Både irreversible og reversible hemmere AV MAO-A (f. eks. fenelzin og moklobemid) brukes med hell som antidepressiva. I denne studien hemmet h. perforatum-ekstrakter humant MAO-A. denne inhiberingen var imidlertid moderat. Det var mer enn tusen ganger lavere enn For P. harmala frøekstrakter. Sacher et al. har rapportert AT belegget AV MAO – a-steder i den menneskelige hjerne bestemt VED PET-avbildning MED 11c-harminbinding (dvs .den samme β-karbolin som er ansvarlig for MAO-hemming i P. harmala) var høy for en reversibel hemmer AV MAO som MOKLOBEMID, men lav For h. perforatum ekstrakt (Johannesurt). Dette betyr at hemmere AV MAO-a i H. perforatum ikke binder seg effektivt til AKTIVE STEDER AV MAO-a i hjernen i motsetning TIL β-carboline harmine. Inhibitorene AV MAO-A I H. perforatum er flavonoider som quercetin og deres glykosider, og nivåene av disse forbindelsene som når hjernen, er kanskje ikke nok til å okkupere MAO-A-stedene i hjernen og hemme enzymet . Inhibitorer Av p. harmala er derimot β-karbolinalkaloider, inkludert harmin og harmalin, som har en veldig god hjernepenetrasjon, binder seg med høy affinitet TIL MAO-steder og utviser antidepressive effekter . Derfor Kunne P. harmala ha råd til antidepressive effekter VED MAO-inhibering. I denne forbindelse kan det være av interesse å undersøke antidepressive effekter Av H. perforatum og p. harmala alene og i kombinasjon som de har forskjellige virkningsmekanismer.

hemming AV MAO-A av h. perforatum og P. harmala ekstrakter kan bidra til andre biologiske effekter av disse plantene som antioksidant handlinger og bivirkninger farmakologiske reaksjoner. Ekstrakter av disse plantene utøver nevrobeskyttende og antiinflammatoriske effekter som har vært relatert til antioksidantaktivitet . I denne forbindelse ved hjelp av en ny prosedyre, resultater i dette arbeidet har vist At H. perforatum Og P. harmala ekstrakter viser antioksidantaktivitet assosiert MED inhibering AV MAO (lavere produksjon AV H2O2). På den annen side er en av de store begrensningene for bruken av disse plantene deres potensial for å produsere uønskede interaksjoner med andre urter, matvarer og rusmidler . Hemming AV MAO-A kan utløse bivirkninger under visse omstendigheter .

4. Konklusjoner

Ekstrakter Fra H. perforatum hemmet humant MAO-A, og ekstrakter fra blomster var de mest potente inhibitorene. De ble studert AV HPLC-DAD-MS og inneholdt pseudohypericin, hypericin, hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og flavonoider. Det høyeste innholdet av disse forbindelsene dukket opp i blomster. Hypericin var en svak hemmer AV MAO-A; hyperforin hemmet ikke enzymet og quercetin var en moderat hemmer. Andelen av quercetinglykosider og flavonoider bidro TIL MAO-hemming. P. harmala frø ekstrakter sterkt hemmet MAO-A og dens styrke av hemming var mer enn tusen ganger høyere Enn H. perforatum ekstrakter på grunn av innholdet i harmaline og harmine alkaloider. L. meyenii rot (maca) ekstrakter ikke hemme MAO-A. hemming AV MAO – A kan ikke forklare hele CNS effekter tilskrives H. perforatum, men det er forventet å bidra til disse handlingene I P. harmala. Disse plantene utøver antioksidant effekter. Ved å bruke en ny metode har dette arbeidet vist At p. harmala og H. perforatum ekstrakter utviser antioksidantaktivitet assosiert med INHIBERING AV MAO.

Interessekonflikter

forfatterne erklærer ingen konkurrerende økonomiske interesser.

Takk

forfatterne takker MINECO-FEDER (SAF2015-66690 – R OG SAF2015-68580-C2-R) OG CSIC (Spania) (Prosjekt 200470e658) for støtte til dette arbeidet. Forfatterne er også takknemlige For Marta Aguilar Preiss for teknisk assistanse og Til Dr. V. Ará for å hjelpe med planteidentifikasjon og utvelgelse.