het Premix WST-1 Cell Proliferation Assay systeem maakt een snelle en eenvoudige colorimetrische meting van celproliferatie en levensvatbaarheid mogelijk in een 96-wells formaat, zonder radioactieve isotopen of organische oplosmiddelen. Het Premix WST-1-systeem van de celproliferatie is ook van toepassing op cytotoxiciteit en remmende analyses, waar de kleurstofproductie eerder afneemt dan toeneemt.
de colorimetrische bepaling is gebaseerd op de splitsing van het tetrazoliumzout WST-1 tot een formazan-klasse kleurstof door mitochondriaal succinaat-tetrazoliumreductase in levensvatbare cellen. Naarmate de cellen zich vermenigvuldigen, wordt meer WST-1 omgezet in het formazan-product. De hoeveelheid formazan-kleurstof is direct gerelateerd aan het aantal metabolisch actieve cellen en kan worden gekwantificeerd door de absorptie te meten bij 420-480 nm (Amax 450 nm) in een multiwellplaatlezer.
een moeiteloos protocol
met het Premix-WST-1-Celproliferatietestsysteem zijn geen stappen voor wassen, oogsten of oplossen vereist. De volledige procedure, van celcultuur tot gegevensanalyse, kan worden uitgevoerd met een multiwell plaatlezer in dezelfde 96-well plaat.
na kweek van uw cellen kan de test binnen ongeveer 1 uur worden voltooid. Voeg eenvoudig het voorgemengde WST-1 Celproliferatiereagens toe aan de plaat, Kweek uw cellen gedurende ten minste 30 minuten in een bevochtigde atmosfeer (tot 4 uur, afhankelijk van het celtype en de dichtheid) en meet de absorptie. Het gekleurde product wordt continu gegenereerd, zodat u de voortgang van uw experiment in de loop van de tijd kunt volgen door de plaat herhaaldelijk te lezen en terug te sturen naar de incubator voor verdere ontwikkeling. Dit elimineert giswerk en zorgt ervoor dat het optimale testeindpunt niet over het hoofd wordt gezien.
Stabiel reagentia
in Tegenstelling tot de traditionele WST-1 gehalte reagentia, die alleen worden opgeslagen voor drie dagen bij 4°C of een maand bij -20°C, de Voorgemengde WST-1-Cel Proliferatie Reagens heeft geformuleerd voor een verhoogde stabiliteit: het kan worden opgeslagen voor twee weken bij 4°C of een jaar bij -20°C. Het wordt geleverd als een gebruiksklare oplossing met WST-1 en een elektron-koppeling-reagens, reagens opgelost in steriel phosphate buffered saline.
niet-radioactieve, colorimetrische bepaling
veel celproliferatiebepalingen zijn gebaseerd op metingen van radioactief gelabelde nucleosideopname tijdens DNA-synthese. De voorgemengde WST-1-test van de Celproliferatiereagentia is nonradioactive, wat gemak en laboratoriumveiligheid verbetert. Bovendien is het voorgemengde WST-1-Celproliferatiereagens in hoge mate in water oplosbaar in vergelijking met andere tetrazoliumzouten die in soortgelijke analyses worden gebruikt, waarvoor surfactanten of organische oplosmiddelen voor oplossing nodig kunnen zijn.
het voorgemengde WST-1-Celproliferatiereagens zal uw celproliferatiebepalingen vereenvoudigen en stroomlijnen. Het eenvoudige, one-solution protocol bespaart tijd en is eenvoudig te gebruiken in een 96-wells plaatformaat. Platen kunnen worden gelezen en teruggestuurd naar de incubator voor verdere ontwikkeling om tijd-cursus experimenten te vereenvoudigen.