Senast uppdaterad den 4 februari 2021 av Sagar Aryal
Salmonella Shigella (SS) Agar är måttligt selektivt och differentiellt medium för isolering, odling och differentiering av Salmonella spp. och några stammar av Shigella spp. SS-Agar är en modifiering av Deoxikolatcitratagar. Det rekommenderas för testning av kliniska prover och livsmedelstestning för förekomst av Salmonella spp. och lite Shigella spp. SS-Agar är ett måttligt selektivt medium där gram-positiva bakterier hämmas av gallsalter, lysande grönt och natriumcitrat. Salmonella Shigella (SS) Agar är mycket selektiv för Salmonella arter, men är hämmande för vissa stammar av Shigella. Det utvecklades för att hjälpa till vid differentiering av laktos och icke-laktosfermentorer från kliniska prover, misstänkta livsmedel och andra sådana prover.
princip för SS-Agar
Salmonella Shigella agar består av gallsalter, natriumcitrat, lysande grön, enzymatisk digest av kasein, nötkött extrakt, enzymatisk digest av djurvävnad, tiosulfat, järncitrat, neutral röd och agar. Införandet av gallsalter, natriumcitrat och lysande grönt tjänar till att hämma gram-positiva, koliforma organismer och hämma svärmande Proteus spp., samtidigt som Salmonella spp tillåts. växa. Nötköttsextrakt, enzymatisk smältning av kasein och enzymatisk smältning av djurvävnad ger källor till kväve, kol och vitaminer som krävs för organismtillväxt. Laktos fungerar som en kolhydratkälla i Salmonella Shigella Agar. Differentiering av enteriska organismer uppnås genom införlivande av laktos i mediet. Organismer som fermenterar laktos producerar syra som, i närvaro av den neutrala röda indikatorn, resulterar i bildandet av röda/rosa kolonier. Icke-fermentorer av laktos bildar färglösa kolonier. Natriumtiosulfat och Järncitrat tillåter detektering av vätesulfid genom produktion av kolonier med svarta centra. Neutral röd blir röd i närvaro av ett surt pH, vilket visar jäsning har inträffat.
sammansättning av SS-Agar
ingredienser | Gms / liter |
laktos | 10.0 |
gallsalter nr.3 | 8.5 |
natriumcitrat | 8.5 |
natriumtiosulfat | 8.5 |
nötkött extrakt | 5.0 |
Proteos pepton | 5.0 |
Järncitrat | 1.0 |
lysande grön | 0.00033 |
Neutral röd | 0.025 |
Agar | 13.5 |
slutlig pH 7.0 +/- 0.2 vid 25 UCC.
beredning av SS-Agar
- suspendera 60 g av mediet i en liter avjoniserat eller destillerat vatten.
- blanda väl.
- värm med frekvent omrörning och koka i en minut.
- autoklavera inte media.
- häll i plattor.
- låt agaren stelna och förvara i kylen (undvik frysning). Beredda kulturmedier kan hållas i minst en vecka i kylning.
resultat tolkning av SS Agar
organismer | resultat |
Shigella | klar, färglös, transparent |
Escherichia coli | liten, rosa till röd |
Enterobacter, Klebsiella | större än E.coli, mucoid, blek, ogenomskinlig grädde till rosa |
Salmonella | färglös, transparent, med svart centrum om H2S produceras |
Proteus | färglös, med svart centrum |
användning av SS Agar
- det används som ett selektivt och differentiellt medium för isolering av Salmonella och vissa Shigella-arter från kliniska och icke-kliniska prover.
- detta medium rekommenderas inte för primär isolering av Shigella.
- det utvecklades också för att hjälpa till vid differentiering av laktos och icke-laktosfermentorer från kliniska prover, misstänkta livsmedel och andra sådana prover.
begränsningar av SS-Agar
- införlivandet av lysande grönt i detta medium gör det mycket selektivt och har visat sig hämma tillväxten av vissa Shigella.
- gallsalterna kan kristallisera över tiden. De verkar som små spindelliknande puffbollar i mediet och påverkar inte mediets prestanda.
- vissa stammar av Shigella, såsom Shigella sonnei och S. dysenteriae serovar 1, kan jäsa laktos relativt långsamt och kolonier ändras till laktosfermentering efter odling i 2 eller flera dagar.
- några icke-patogena organismer kan växa på Salmonella Shigella agar.
- det rekommenderas att biokemiska, immunologiska, molekylära eller masspektrometritester utförs på kolonier från ren odling för fullständig identifiering.