Abstract
MAO katalyserer den iltningsgivende deaminering af aminer og neurotransmittere og er involveret i humørsygdomme, depression, iltningsspænding og uønskede farmakologiske reaktioner. Dette arbejde studerer inhiberingen af human MAO-A af Hypericum perforatum, Peganum harmala og Lepidium meyenii, som rapporteres at forbedre og påvirke humør og mentale tilstande. Derefter bestemmes den antioksidante aktivitet, der er forbundet med inhiberingen af MAO, i planteekstrakter for første gang. H. perforatum hæmmede human MAO-A, og ekstrakter fra blomster gav den højeste hæmning (IC50 på 63,6 liter/mL). Planteekstrakter blev analyseret af HPLC-DAD-MS og indeholdt pseudohypericin, hypericin, hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og flavonoider. Hyperforin hæmmede ikke human MAO – A, og hypericin var en dårlig hæmmer af dette isoensym. Kvercetin og flavonoider bidrog væsentligt til MAO-A-hæmning. P. harmala frøekstrakter stærkt hæmmet MAO-A (IC50 på 49,9 larg/L), der er tusind gange mere potent end H. perforatum ekstrakter på grund af dets indhold af LARP-carbolin alkaloider (harmalin og harmin). L. meyenii root (maca) ekstrakter hæmmede ikke MAO-A. Disse planter kan udøve beskyttende handlinger relateret til antioksidant virkninger. Resultater i dette arbejde viser, at P. harmala og H. perforatum ekstrakter udviser antioksidant aktivitet forbundet med inhibering af MAO (dvs.lavere produktion af H2O2).
1. Introduktion
metaboliserer fremmedfjendske og endogene aminer og neurotransmittere, herunder serotonin, dopamin, noradrenalin, tyramin, tryptamin og neurotoksin MPTP . Det forekommer som to isoensymer, MAO-A og MAO-B, som spiller en vigtig rolle i centralnervesystemet (CNS) og perifere organer. MAO-B er involveret i neurodegenerative sygdomme og MAO-A i psykiatriske tilstande og depression. Hæmmere af MAO-B er nyttige som neurobeskyttende midler, mens hæmmere af MAO-A er effektive antidepressiva, selvom deres anvendelse kan udløse bivirkninger (f .eks. hypertensiv krise med fødevarer, der indeholder tyramin). På den anden side genererer iltningen af biogene aminer og neurotransmittere brintoverilte (H2O2), iltradikaler og aldehyder, som er risikofaktorer for celleoksidativ skade. Derfor kan hæmning af MAO resultere i beskyttelse mod oksidativ stress og neurotoksiner . Nylige undersøgelser har påpeget, at plante-og fødevareekstrakter kan hæmme MAO-bakterier, hvilket resulterer i de ovennævnte biologiske virkninger . På den anden side kan disse produkter som følge af MAO-hæmning være involveret i uønskede interaktioner med andre urtepræparater, fødevarer eller stoffer .
Hypericum perforatum L. (familie Hypericaceae) (johannesurt) bruges i vid udstrækning til sundhedsmæssige formål, og deres produkter er kommercielt tilgængelige som urter, nutraceuticals, te, tinkturer, juice, olieagtige macerater, phytopharmaceuticals og fødevaretilsætningsstoffer og kosttilskud . H. perforatum er populært til behandling af mild og moderat depression . Det kan udløse negative farmakologiske interaktioner med andre urter, stoffer eller fødevarer . Dens evne til at lindre og forbedre humørsygdomme og depression tilskrives aktive forbindelser, der udviser antidepressive egenskaber . Den mest accepterede virkningsmekanisme er hæmning af genoptagelse af monoamin, men yderligere mekanismer, herunder hæmning af monoaminoksidase og synergistiske virkninger, kan være involveret . Peganum harmala (familie) og Lepidium meyenii (familie Brassicaceae) (maca) er planter med CNS-virkninger og potentielle antidepressive virkninger . P. harmala, hjemmehørende i Middelhavsområdet og Asien og udvidet til Nordamerika områder, bruges som et multifunktionelt sundhedsmiddel, herunder CNS-lidelser. Forberedelser af denne plante kan udløse negative farmakologiske interaktioner . L. meyenii er en spiselig plante fra de centrale Andesbjergene, hvis rødder bruges som en fødevare stimulans og nutraceutical at forbedre fysiske og mentale betingelser og frugtbarhed . Formålet med dette arbejde var at undersøge inhiberingen af human MAO-A ved ekstrakter af H. perforatum, P. harmala og L. meyenii (maca) såvel som ved deres aktive komponenter, der blev identificeret og analyseret af HPLC-DAD-MS og derefter evaluere den antioksidante aktivitet, der specifikt er forbundet med inhiberingen af MAO. Denne specifikke antioksidantaktivitet bestemmes for første gang i planteekstrakter.
2. Materialer og metoder
Hypericum perforatum L. planter opsamlet i Ciudad Real (Spanien) blev tørret og adskilt i dele: blomster; øverste luftdele af planten inklusive forgrenede stængler og blade, men ingen blomster; og hovedstængler (centrale og nedre) og rødder. De blev malet, og pulveret blev brugt til prøveforberedelse. Kommercielle urter og urtetilskud (kapsler og tabletter) af H. perforatum blev også købt i lokale urtebutikker. Peganum harmala L. plante og frø blev indsamlet i Toledo (Spanien). Lepidium meyenii (maca) både som pulver og kommercielle tabletter blev opnået fra Peru og lokale butikker. Hypericin standard (>95% purity by HPLC) from HWI Analytik GMBH pharma solutions, hyperforin dicyclohexylammonium salt, quercetin, harmaline, harmine, catalase, clorgyline, 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine (TMB), and horseradish peroxidase (HRP) type II were purchased from Sigma-Aldrich.
2.1. Sample Preparation of Plant Extracts
Samples containing H. perforatum (i.e., plant parts, herbal preparation, capsules, or tablets) (500 mg) were homogenized in 10 mL of water/methanol (1 : 1) ved anvendelse af en ultra Turrakshomogenisator, centrifugeret ved 10000 o / min i 10 minutter, og supernatanten blev opsamlet. Processen blev gentaget to gange med resten og de tre supernatantfraktioner opsamlet, blandet og analyseret af HPLC som nævnt nedenfor. Efter tre på hinanden følgende ekstraktioner var genopretningerne af hypericin og pseudohypericin højere end 97%. Prøver af L. meyenii (maca) (500 mg) og P. harmala frø (500 mg) blev homogeniseret henholdsvis i 10 mL vand/methanol (1 : 1) eller 10 mL 0,6 M perchlorsyre : methanol (1 : 1) ved anvendelse af en ultra Turrakshomogenisator, centrifugeret ved 10000 o / min i 10 minutter, og supernatanten blev opsamlet. Denne proces blev gentaget to gange med remanensen, og de opsamlede supernatanter blev blandet og analyseret af HPLC som nævnt nedenfor.
2.2. RP-HPLC-analyse af planteekstrakter
analysen af H. perforatumekstrakter blev udført af RP-HPLC med UV-diodearray og fluorescensdetektion ved hjælp af en HPLC 1050 (Agilent) kombineret med en 1100 diode array detektor (DAD) (Agilent) og en 1046a-fluorescensdetektor. En 150 3,9 mm i. d., 4 liter, Nova-pak C18 kolonne (farvande) blev brugt til adskillelse. Kromatografiske betingelser var 50 mM ammoniumphosphatbuffer (pH 3) (buffer A) og 20% af A i acetonitril (buffer B). Gradienten blev programmeret fra 0% (100% A) til 32% B på 8 minutter og 100% B ved 10 minutter. Strømningshastigheden var 1 mL / min, søjletemperaturen var 40 liter C, og injektionsvolumenet var 20 liter. Detektion af hypericiner blev udført ved absorbans ved 590 nm og fluorescens ved 236 nm for eksitation og 592 nm for emission. Koncentrationen af hypericin blev bestemt ud fra en kalibreringskurve for respons (absorbans ved 590 nm) versus koncentration med opløsninger fremstillet i laboratoriet ud fra hypericin-standard. Den samme responsfaktor blev anvendt på pseudohypericin, protohypericin og protopseudohypericin. Flavonoider og flavonoidglycosider blev analyseret ved 265 nm og 355 nm, og koncentrationen af kvercetin blev bestemt ved 355 nm ud fra en kalibreringskurve for respons versus koncentration. HPLC-fraktionen svarende til flavonoider og flavonoidglycosider (7 til 11 min) blev opsamlet ved successive injektioner af H. perforatumekstrakt (urter) og efter fordampning i vakuum opløst i 30% methanol og anvendt til MAO-A-inhibering. Phloroglucinolerne (hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og adhyperfirin) blev analyseret ved 280 nm ved anvendelse af den samme søjle (Nova-pak C18) og betingelser, men under isokratisk eluering med 20% af 50 mM ammoniumphosphatbuffer, pH 3 og 80% acetonitril. Koncentrationen af disse forbindelser blev bestemt ud fra en kalibreringskurve af hyperforin-standard. Analysen af urin-carbolinalkaloider i P. harmala og L. meyenii blev udført som tidligere beskrevet .
2.3. Identifikation ved HPLC-ESI-massespektrometri
identifikation af forbindelser i H. perforatumekstrakter blev udført ved HPLC-MS (elektrospray-negativ iontilstand) ved anvendelse af en 1200 serie HPLC-DAD koblet til en 6110 kvadrupol-MS (Agilent). Kromatografisk separation blev udført på en 150 2,1 mm i.D. SB-C18 (5 liter) kolonne (Agilent Technologies). De kromatografiske betingelser var eluente a: myresyre (0,1%); B: myresyre (0,1%) i acetonitril; gradient: 0% til 70% B på 8 min og 100% B ved 10 min, strømningshastighed: 0,3 mL/min; : 40 liter C; masseområde: 50-700 u og keglespænding: 150 V. til identifikation af phloroglucinoler (f.eks. hyperforin) blev separation udført ved hjælp af en Nova-pak C18 (4 liter) kolonne med de samme eluenter og isokratisk eluering (eluent a, 20% og eluent B, 80%) ved en strømningshastighed på 0,7 ml/min og massespektre registreret i negativ og positiv ionisering. Identifikation af forbindelser blev udført på basis af massespektre, UV-vis spektre (DAD) af kromatografiske toppe og coelution med standarder. karboliner i P. harmala og L. meyenii blev identificeret som tidligere beskrevet .
2.4. MAO-A-Inhiberingsanalyser
MAO-analyser blev udført som andre steder . Kort fortalt blev membranproteinfraktioner indeholdende MAO-A (BD-Gentest) fortyndet til de ønskede koncentrationer i 100 mM kaliumphosphatbuffer (pH 7,4). En 0,2 mL reaktionsblanding indeholdende 0,01 mg/mL protein og 0.25 mM kynuramin i 100 mM kaliumphosphat (pH 7,4) blev inkuberet ved 37 liter C i 40 minutter. Efter inkubation blev reaktionen standset ved tilsætning af 2 N NaOH (75 liter), efterfulgt af tilsætning af 70% HClO4 (25 liter), og prøven blev centrifugeret (10000) i 10 minutter. Supernatanten (20 liter) blev injiceret i HPLC og deamineringsproduktet af kynuramin (dvs.4-hydroksykinolin) dannet under reaktion bestemt ved RP-HPLC-diode array detektion ved 320 nm. En responskurve for areal versus koncentration blev konstrueret til at beregne koncentrationen af 4-hydroksykinolin. For at udføre analyser af MAO-inhibering blev alikvoter af ekstrakter fra planter eller kommercielle præparater eller i stedet rene forbindelser bekvemt fortyndet og tilsat til reaktionsblandinger indeholdende kynuramin (0,25 mM) og MAO-A (0,01 mg/mL protein) i 100 mM kaliumphosphatbuffer (pH 7,4), med en sådan reaktion og analyse udført som ovenfor og sammenlignet med de tilsvarende kontroller indeholdende opløsningsmiddel. Standardinhibitoren clorgylin blev anvendt som en positiv kontrol til inhibering (>90% inhibering ved 2, 5 liter). Inkubationer blev udført i det mindste i to eksemplarer fra forskellige eksperimenter, og IC50-værdierne blev beregnet ved hjælp af GraphPad Prism 4.0.
2.5.
Assays (0,2 mL) af reaktionsblandinger i 70 mM kaliumphosphatbuffer (pH 7,4), indeholdende 0,025 mg/mL MAO-A-protein og 0,25 mM kynuramin, blev inkuberet ved 37 kg C i 40 minutter i fravær (kontrolassays) eller i nærvær af planteekstrakter. MAO-analyser blev også udført i nærvær af clorgylin (25 liter), en klassisk hæmmer af MAO-A (positiv kontrol med inhibering) eller katalase (100 liter/mL). Efter inkubationsperioden blev reaktionsblandingen tilsat aktivt kul (3,5 mg), blandet og filtreret (0,45 liter). Opløsningen blev tilsat med 20 liter 10 mM tetramethylbensidin (TMB) i 40% DMSO og 20 liter peberrodsperidase (HRP) type II (1 mg/mL), holdt 5 min og tilsat med 0,3 mL 0,5 M H2SO4 opløsning. Absorbansen ved 450 nm blev målt for at bestemme TMB-diimin, et gult produkt som følge af iltning af TMB ved HRP og H2O2 genereret i den iltende deaminering katalyseret af MAO. Iltning af TMB i nærvær af MAO-hæmmere blev sammenlignet med de tilsvarende kontroller uden inhibitorer, og passende emner viste fravær af interferenser.
3. Resultater og diskussion
kommercielle præparater af H. perforatum hæmmede human MAO-A med lignende styrke: IC50-værdier på 142,3 liter 30.6 kg/mL (urtepræparat), 193 kg 61 kg/mL (kapsler) og 173 kg 29 kg/mL (tabletter) (Figur 1 a)). Med hensyn til planter gav H. perforatum-ekstrakter fra blomster den højeste hæmning (IC50 på 63,6 liter 9,4 liter/mL) efterfulgt af luftstængler og blade (IC50 143,6 liter 16,5 liter/mL) og den laveste i rodekstrakter(Figur 1 (b)). Ekstrakter fra luftdelene af H. perforatum blev analyseret af HPLC-DAD-ESI (elektrospray-negativ ionisering). De viste tilstedeværelsen af to store naphthodiantroner identificeret som pseudohypericin og hypericin (figur 2(A) og tabel 1). Blomsterekstrakter havde to yderligere forbindelser identificeret som protopseudohypericin og protohypericin. Phenoler og flavonoider vrimlede i H. perforatum ekstrakter(figur 2 (b)). HPLC-DAD (ESI-negativ ionisering) og DAD (tabel 1) blev identificeret af HPLC-DAD (ESI-negativ ionisering) og DAD (tabel 1). På den anden side indeholdt blomsterekstrakter fire phloroglucinoler (figur 2(c)), der blev identificeret ved HPLC-DAD-MS (ESI-negativ og positiv ionisering) og DAD som hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og adhyperfirin (tabel 1). Tilstedeværelsen af disse forbindelser (figur 3) i planten stemmer overens med andre resultater . Indholdet af hovedkomponenterne blev bestemt af HPLC (tabel 2). Koncentrationen af pseudohypericin var højere end hypericin, mens protopseudohypericin og protohypericin var mindre forbindelser (0, 4 liter/mg protopseudohypericin og 0.17 liter/mg protohypericin blev påvist i blomster). I planten blev det højeste indhold af hypericiner fundet i blomster med signifikant lave niveauer påvist i stængler og fravær i rødder. Hyperforin var meget rigeligt i blomster (27,2 liter/mg), mens koncentrationen i kommercielle præparater varierede fra 0,36 til 2,4 liter/mg. I blomster, adhyperforin (1.4 ± 0.07 µg/mg), hyperfirin (4.2 ± 0.02 µg/mg), og adhyperfirin (0.46 ± 0.02 µg/mg) syntes også. Flavonoider vrimlede i H. 2 (b)), hvis tilstedeværelse var signifikant højere i blomster end i andre dele af planten. Indholdet af frit kvercetin i blomster var 2,0 liter / mg, mens et indhold på 6,7 liter/mg blev bestemt i kommercielle præparater.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| forbindelser gav også deres tilsvarende (M + H)+ og (M + K)+ ioner under ESI-positiv ionisering. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| væsentlige forskelle () for en forbindelse inden for en gruppe er angivet med forskellige bogstaver. 1 liter stof / mg plantevæv til plantedele og urter eller mg pulver i kapsler og tabletter. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(a)
(b)
(a)
(b)
(a) nm
(b) nm
(c) nm
(a) nm
(b) nm
(c) nm
hæmningen af MAO-A af H. perforatumekstrakter indikerer forekomst af hæmmere. Hypericiner, hyperforin og flavonoider er mulige bidragydere til denne hæmning og blev evalueret som hæmmere (figur 4). Hypericin hæmmede MAO-A (IC50 på 35,5 liter 2,1 liter eller 17,9 liter/mL) (figur 4 (a)). Fra koncentrationen i tabel 2 er hypericin en svag bidragyder til Mao-hæmning i H. perforatumekstrakter. Faktisk var det beregnede indhold af hypericin ved IC50-værdi i assays af blomsterekstrakt (dvs.63,6 liter/mL) 0,1 liter/mL, hvilket er lavt sammenlignet med IC50 liter hypericin (17,9 liter/mL). Hyperforin hæmmede ikke MAO-A(figur 4 (b)). 4 (B)) med en IC50-værdi på 11,1 liter 0,8 liter(dvs.3,36 liter/mL). Derefter var kvercetin en bedre hæmmer end hypericin, selvom dens styrke stadig var lav for at forklare hele hæmning af ekstrakter. Det beregnede indhold af kvercetin ved IC50 i analyser af blomsterekstrakt var således 0,13 liter / mL, hvilket er lavere end IC50 % af kvercetin (3,4 liter/mL). Når fraktionen svarende til kvercetinglycosider og flavonoider (7-11 min, figur 2(B)) blev opsamlet af RP-HPLC, hæmmede den MAO-A (90% inhibering ved 700 liter/mL ekstrakt), hvilket indikerer et bidrag fra disse forbindelser til Mao-inhibering i H. perforatum, sandsynligvis ved additive virkninger. Derefter kan hæmning af MAO – A opstå fra komponenter såsom kvercetin og relaterede flavonoider (dvs.kvercetin glycosider), som er rigelige i planten. Derudover kunne mindre forbindelser, der ikke er identificeret her, også bidrage til Mao-hæmning, da større forbindelser i tabel 2 ikke forklarer hel hæmning.
(a)
(b)
(a)
(b)
ekstrakter fra P. harmala frø stærkt hæmmet human MAO-A(figur 5 (a)), der giver en IC50-værdi på 49,9 liter 5,6 liter/L. Kromatografisk analyse indikerede, at hæmning skyldtes tilstedeværelsen af de alkaloider, harmalin og harmin, der blev identificeret af HPLC-DAD-MS (figur 5(c)). Indholdet af disse alkaloider bestemt i frø var 48,5 mg/g for harmalin og 40,0 mg/g for harmin (dette betyder 2,4 ng/mL og 2,0 ng/mL, resp., i analyser på IC50). Derfor var inhiberingsstyrken af MAO – A af P. harmala frø 1274 gange mere potent end for H. perforatum blomster. Som vist i figur 5 (b) hæmmede Lepidium meyenii rodekstrakter ikke human MAO-A. L. meyenii (maca) er en populær plante fra Andes højland, hvis rødder i stigende grad bruges til dets ernæringsmæssige og medicinske egenskaber som energigivende og for at forbedre humør og seksuel præstation . Tidligere rapporter har vist, at de indeholder alkaloider, herunder LARP-carboliner, der kan hæmme MAO. Analyse af ekstrakter for cholin-carbolinalkaloider gav 25 cholg/g (Maca-pulver) og 11,7 cholg/g (kapsler) 1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-cholin-3-carbonsyre som hovedforbindelse. Denne specifikke LARP-carbolin er ikke en hæmmer af MAO-A .
(a)
(b)
(c)
(a)
(b)
(c)
MAO genererer brintoverilte (H2O2), der er involveret i iltning celleskader og patologiske tilstande . Derefter kan inhiberingen af MAO resultere i specifikke antioksidant handlinger . For at studere den antioksidante aktivitet, der er forbundet med MAO-hæmning, blev eksperimenter designet i denne forskning, der forbandt aktiviteten af MAO-A med oksidering af tetramethylbensidin (TMB) med peberrodsperidase (HRP) og H2O2 produceret under oksidativ deaminering katalyseret af MAO (figur 6). H. perforatum og P. harmala ekstrakter, som hæmmede MAO-A som vist ovenfor stærkt nedsat iltning af TMB. I modsætning hertil havde L. meyenii root (maca) ekstrakter, der ikke hæmmer MAO, en lav antioksidant aktivitet i dette assay. Clorgyline, som er en potent hæmmer af MAO-A, reducerede stærkt iltningen af TMB, når den blev brugt som kontrol. Det samme skete med tilstedeværelsen af katalase i medierne, der fjerner H2O2 genereret af MAO-A. Derfor indikerer disse resultater, at H. perforatum og P. harmala ekstrakter gav specifikke antioksidant handlinger forbundet med en lavere produktion af H2O2 ved inhibering af MAO.
H. perforatum forbedrer humørsygdomme og depression . Som vist her indeholder den forbindelser som hyperforin, hypericiner og flavonoider, der er ansvarlige for antidepressive virkninger (figur 2 og tabel 2). Den specifikke mekanisme til antidepressiv virkning forstås imidlertid ikke fuldstændigt. Den mest accepterede mekanisme er hæmning af genoptagelse af monoamin . Nogle undersøgelser antyder imidlertid en kombination af mekanismer og synergistiske effekter . P. harmala udøver adskillige biologiske og farmakologiske virkninger. Deres frø bruges i stigende grad til rekreative formål på grund af deres psykoaktive og neuroaktive virkninger . Inhiberingen af human MAO-A er en etableret mekanisme til antidepressiv virkning . Både irreversible og reversible MAO-A-hæmmere (f.eks. I denne undersøgelse hæmmede H. perforatumekstrakter human MAO-A. Denne hæmning var imidlertid moderat. Det var mere end tusind gange lavere end for P. harmala frøekstrakter. Sacher et al. har rapporteret, at belægningen af MAO-A-steder i den menneskelige hjerne bestemt ved PET-billeddannelse med 11C-harmin-binding (dvs .den samme karbolin, der er ansvarlig for MAO-hæmning i P. harmala) var høj for en reversibel hæmmer af MAO, såsom moclobemid, men lav for H. perforatum-ekstrakt (johannesurt). Dette betyder, at inhibitorerne af MAO-A i H. perforatum ikke binder effektivt til aktive steder af MAO-A i hjernen i modsætning til kurr-carbolin harmin. Hæmmere af MAO-A i H. perforatum er flavonoider som f .eks. kercetin og deres glycosider, og niveauerne af disse forbindelser, der når hjernen, er måske ikke nok til at besætte MAO-A-stederne i hjernen og hæmme det. I modsætning hertil er inhibitorerne af P. harmala larr-carbolinalkaloider inklusive harmin og harmalin, som har en meget god hjerneindtrængning, binder med høj affinitet til MAO-steder og udviser antidepressive virkninger . Derfor kunne P. harmala have råd til antidepressive virkninger ved Mao-hæmning. I denne henseende kan det være af interesse at undersøge de antidepressive virkninger af H. perforatum og P. harmala alene og i kombination, da de har forskellige virkningsmekanismer.
hæmningen af MAO-A ved H. perforatum og P. harmala ekstrakter kan bidrage til andre biologiske virkninger af disse planter, såsom antioksidant handlinger og bivirkninger farmakologiske reaktioner. Ekstrakter af disse planter udøver neuroprotektive og antiinflammatoriske virkninger, der har været relateret til antioksidant aktivitet . I denne henseende ved hjælp af en ny procedure, resultater i dette arbejde har vist, at H. perforatum og P. harmala ekstrakter viser antioksidant aktivitet forbundet med hæmning af MAO (lavere produktion af H2O2). På den anden side er en af de største begrænsninger for brugen af disse planter deres potentiale for at producere negative interaktioner med andre urter, fødevarer og stoffer . Inhiberingen af MAO – A kan udløse bivirkninger under visse omstændigheder .
4. Konklusioner
ekstrakter fra H. perforatum hæmmede human MAO-A, og ekstrakter fra blomster var de mest potente hæmmere. De blev undersøgt af HPLC-DAD-MS og indeholdt pseudohypericin, hypericin, hyperforin, adhyperforin, hyperfirin og flavonoider. Det højeste indhold af disse forbindelser optrådte i blomster. Hypericin var en svag hæmmer af MAO-A, og hyperforin var en moderat hæmmer. Fraktionen af kvercetin glycosider og flavonoider bidrog til Mao-hæmning. P. harmala frøekstrakter stærkt hæmmet MAO-A og dens styrke af inhibering var mere end tusind gange højere end H. perforatum ekstrakter på grund af dets indhold i harmalin og harmin alkaloider. L. meyenii-rodekstrakter (maca) hæmmede ikke MAO-A. hæmningen af MAO-A forklarer muligvis ikke hele CNS-virkningerne, der tilskrives H. perforatum, men det forventes at bidrage til disse handlinger i P. harmala. Disse planter udøver antioksidante virkninger. Ved at anvende en ny metode har dette arbejde vist, at P. harmala og H. perforatum ekstrakter udviser antioksidant aktivitet forbundet med inhiberingen af MAO.
interessekonflikter
forfatterne erklærer ingen konkurrerende økonomisk interesse.
anerkendelser
forfatterne er taknemmelige for MINECO-FEDER (SAF2015-66690-R og SAF2015-68580-C2-R) og CSIC (Spanien) (projekt 200470e658) for at støtte dette arbejde. Forfatterne er også taknemmelige over for Marta Aguilar Preiss for teknisk assistance og til Dr. V. ar Kurtn for at hjælpe med planteidentifikation og udvælgelse.