M13 Phage Library Construction Service
som en ubestridt forløber og innovativ opdagelsesrejsende inden for antistofteknik og fremstilling har Creative Biolabs etableret et komplet udvalg af professionelle tjenester baseret på vores eksklusive fagvisningsteknologier. Blandt dem er Creative Biolabs stolt af vores fremragende M13 phage library construction service, som kan generere biblioteker af høj kvalitet til vores kunder over hele verden.
født i 1985 er phage display en hurtig, pålidelig og bekvem metode til at konstruere store peptidbiblioteker og tilbyder en ligetil tilgang til at isolere og udbrede unikke kloner med ønskede egenskaber gennem høj effektiv biopanning. Denne teknologi bidrager til forskellige forsknings -, medicinske og industrielle anvendelser, såsom antistofopdagelse og-teknik, epitopkortlægning, lægemiddeludvikling, vaccinedesign og så videre. I modsætning til konventionel hybridomametode har fagdisplay vist sin ekstraordinære tiltrækningskraft inden for monoklonal antistofopdagelse på grund af egenskaberne ved let håndtering, høj effektivitet, forskellige valg af værtsdyr og immunogenicitetsuafhængighed.
blandt mange fagkøretøjer, der i øjeblikket er i anvendelse, har M13 filamentous phage altid været den mest populære mulighed og i vid udstrækning brugt i forskellige typer forskning. M13 er en skabelon bakteriofag af E. coli med et typisk langstangudseende indeholdende et enkeltstrenget DNA (6407 bp) genom. Den virale pels består af fem forskellige capsid proteiner, major capsid pVIII (2700 kopier) og fire mindre capsider (pIII og pVI i den ene ende, mens pVII og pik i den anden ende). I modsætning til T4 og T7 er M13 lysogen fag, som samles i periplasmen og udskilles ud af bakteriemembranen uden at forårsage værtslyse.
M13 ‘ s multiple capsid-proteiner giver omfattende displayvalg, der kan anvendes til at vise en række peptider og proteiner med karakteristiske egenskaber. Alle fem capsider har med succes udstillet udenlandske domænebiblioteker, som hver især gør en unik vektor til forskellige funktioner. I de fleste tilfælde er pIII og pVIII imidlertid de foretrukne valg for M13 fagdisplay.
- pVIII-fusion display: som den største kapsid med 2700 eksemplarer pr.fag, omslutter pVIII den virale partikel som spiky fremspring. N-terminale fusioner til pVIII muliggør visning med høj densitet af korte peptider mindre end 9 aminosyrer, fordi store indsættelser kan afbryde fagsamlingen. Pviii-displayet anbefales, når der kræves massive displaykopier, såsom aviditetsvurdering, protein-protein-interaktioner og immunologiske analyser.
- pIII-fusion display: placeret i den ene ende af virionen med 4-5 kopier, er pIII involveret i værtsbindende proces under infektion. pIII kan udholde store peptid-og proteinindsættelser, men normalt med lav ekspressionshastighed. Derfor er brug af pIII-skærm mest passende til valg af høj affinitet under panoreringsprocessen. Store native antistofbiblioteker præsenteret på pIII er blevet bevist som en stærk tilgang til at generere meget specifikke og affinitetsantistofkandidater rettet mod en række antigener.
- andre displayvektorer: bortset fra pVIII og pIII kan andre capsider også udnyttes som et alternativ. Mindre capsid pVI er i stand til at udstille fusionsproteiner ved sin C-terminal, hvilket gør det acceptabelt til visning af cDNA-biblioteker. pvii og pVII fremstår også som lovende køretøjer for deres signalsekvensuafhængighed, høj genvindingshastighed samt høj selektionseffektivitet, hvilket tyder på et stort potentiale for dobbelt visning af stedet.
med mange års hengivenhed og akkumulering inden for dette særlige felt, Creative Biolabs har konstant udviklet og forbedret førende fagskærmsteknologier, samtidig med at de leverer teknisk support af høj kvalitet til vores verdensomspændende kunder. Baseret på vores patentplatforme og præcise protokoller har forskere i Kreative Biolabs med succes opbygget upåklagelige fagdisplaybiblioteker af forskellige typer (herunder antistof, peptid, cDNA, protein stillads osv.) og isolerede specifikke kloner med passende egenskaber. Vi er glade for at tilbyde disse integrerede tjenester fra M13 fagdisplaybiblioteker samt snesevis af foruddefinerede antistofbiblioteker for bedst at lette vores kunders forskningsprojekter.
Fig 1. Livscyklussen for filamentøse fager. (Huang, Bishop-Hurley and Cooper 2012)
Reference
- Huang, J. H., Bishop-Hurley, S. L. og Cooper, M. A. (2012) ‘udvikling af antiinfektionsmidler ved hjælp af fagdisplay: biologiske agenser mod bakterier, vira og parasitter’, antimikrobielle midler og kemoterapi, 56(9), 4569-4582.
alle listede tilpassede tjenester & produkter er kun til forskningsbrug, ikke beregnet til farmaceutisk, diagnostisk, terapeutisk eller nogen in vivo human brug.