Ultimo Aggiornamento il 4 febbraio 2021 da Sagar Aryal
Salmonella Shigella (SS) Agar è moderatamente selettivo e differenziale medio per l’isolamento, la coltura e la differenziazione di Salmonella spp. e alcuni ceppi di Shigella spp. L’agar SS è una modifica dell’agar desossicolato citrato. È raccomandato per testare campioni clinici e test alimentari per la presenza di Salmonella spp. e alcuni Shigella spp. L’agar SS è un mezzo moderatamente selettivo in cui i batteri gram-positivi sono inibiti dai sali biliari, dal verde brillante e dal citrato di sodio. L’agar di Salmonella Shigella (SS) è altamente selettivo per le specie di salmonella, ma è inibitorio ad alcuni ceppi di Shigella. È stato sviluppato per aiutare nella differenziazione di lattosio e non lattosio-fermentatori da campioni clinici, alimenti sospetti e altri tali campioni.
Principio di SS Agar
Salmonella Shigella agar comprende sali biliari, citrato di sodio, verde brillante, digestione enzimatica della caseina, estratto di manzo, digestione enzimatica del tessuto animale, tiosolfato, citrato ferrico, rosso neutro e agar. L’inclusione di sali biliari, citrato di sodio e Verde brillante servono per inibire gram-positivi, organismi coliformi e inibire brulicante Proteus spp., pur consentendo Salmonella spp. crescere. L’estratto di manzo, il digest enzimatico della caseina e il Digest enzimatico del tessuto animale forniscono fonti di azoto, carbonio e vitamine necessarie per la crescita dell’organismo. Il lattosio serve come fonte di carboidrati nell’agar di Salmonella Shigella. La differenziazione degli organismi enterici si ottiene incorporando il lattosio nel mezzo. Gli organismi che fermentano il lattosio producono acido che, in presenza dell’indicatore rosso neutro, provoca la formazione di colonie rosso/rosa. I non fermentatori del lattosio formano colonie incolori. Il tiosolfato di sodio e il citrato ferrico consentono la rilevazione dell’idrogeno solforato mediante la produzione di colonie con centri neri. Il rosso neutro diventa rosso in presenza di un pH acido, mostrando così che si è verificata la fermentazione.
Composizione del SS Agar
Ingredienti | Gms/litro |
Lattosio | 10.0 |
sali Biliari n.3 | 8.5 |
citrato di Sodio | 8.5 |
tiosolfato di Sodio | 8.5 |
estratto di carne | 5.0 |
Proteose peptone | 5.0 |
Citrato Ferrico | 1.0 |
verde Brillante | 0.00033 |
rosso Neutro | 0.025 |
Agar | 13.5 |
Finale di pH 7.0 +/- 0.2 a 25ºC.
Preparazione di Agar SS
- Sospendere 60 g del mezzo in un litro di acqua deionizzata o distillata.
- Mescolare bene.
- Scaldare con frequente agitazione e far bollire per un minuto.
- Non autoclavi il supporto.
- Versare nei piatti.
- Lasciare solidificare l’agar e conservare in frigorifero (evitare il congelamento). I terreni di coltura preparati possono essere conservati per almeno una settimana in refrigerazione.
Interpretazione dei Risultati SS Agar
Organismi | Risultato |
Shigella | Chiaro, incolore, trasparente |
Escherichia coli | Piccolo, il rosa ed il rosso |
Enterobacter, Klebsiella | Maggiore di E.coli, mucoide, pallido, opaco crema alla rosa |
Salmonella | Incolore, trasparente, nero centro se H2S viene prodotto |
Proteus | Incolore, con centro nero |
Utilizza dei SS Agar
- È usato come un selettivo e differenziale medio per l’isolamento di Salmonella e di alcune specie di Shigella clinici e non clinici esemplari.
- Questo mezzo non è raccomandato per l’isolamento primario di Shigella.
- È stato anche sviluppato per aiutare nella differenziazione del lattosio e dei fermentatori non lattosio da campioni clinici, alimenti sospetti e altri campioni simili.
Limitazioni dell’agar SS
- L’incorporazione di verde brillante in questo mezzo lo rende altamente selettivo, ed è stato dimostrato di inibire la crescita di alcuni Shigella.
- I sali biliari possono cristallizzare nel tempo. Appaiono come piccole sfere di soffio simili a ragni all’interno del mezzo e non influenzano le prestazioni del mezzo.
- Alcuni ceppi di Shigella, come Shigella sonnei e S. dysenteriae serovar 1, possono fermentare il lattosio relativamente lentamente, e le colonie cambiano in fermentazione del lattosio dopo la coltivazione per 2 o più giorni.
- Alcuni organismi non patogeni possono crescere su Salmonella Shigella agar.
- Si raccomanda di eseguire test biochimici, immunologici, molecolari o di spettrometria di massa su colonie provenienti da colture pure per una completa identificazione.