M13 serviço de construção de biblioteca de fagos

As an undisputed forerunner and innovative explorer in the field of anticorpo engineering and manufacture, Creative Biolabs has established a full range of professional services based on our exclusive phage display technologies. Entre eles, a Creative Biolabs orgulha-se do nosso excelente serviço de construção de bibliotecas FAG do M13, que pode gerar bibliotecas de alta qualidade para os nossos clientes em todo o mundo.

Born in 1985, phage display is a fast, reliable and convenient method to construct large peptide libraries and offers a straightforward approach to isolate and propagate unique clones with desired properties through high efficient biopanning. Esta tecnologia contribui para várias aplicações médicas e industriais, tais como descoberta e engenharia de anticorpos, mapeamento de epítopos, desenvolvimento de drogas, design de vacinas, etc. Em contraste com o método hibridoma convencional, o visor de fagage demonstrou sua excepcional atratividade no campo da descoberta de anticorpos monoclonais, devido às propriedades de fácil manuseio, alta eficiência, escolhas diversas de animais hospedeiros e independência de imunogenicidade.

Among many phage vehicles currently in apply, M13 filamentous phage has always been the most popular option and extensively used in various types of research. M13 é um modelo bacteriofágico de E. coli com um aspecto típico de haste longa contendo um genoma de ADN único (6407 bp). A pelagem viral é composta por cinco diferentes proteínas capsídicas, a principal capsídea pVIII (2700 cópias) e quatro pequenas capsídeas (pIII e pVI numa extremidade, enquanto pVII e pIX na outra extremidade). Ao contrário de T4 e T7, M13 é um fago lisogênico que é montado no periplasma e secretado para fora da membrana bacteriana sem causar lise Hospedeira.

as múltiplas proteínas capsides de M13 fornecem opções de exibição abrangentes que podem ser empregadas para exibir uma variedade de peptídeos e proteínas com características distintivas. Todos os cinco capsids exibiram com sucesso bibliotecas de domínio estrangeiro, cada uma das quais faz um vetor único para diferentes características. No entanto, na maioria dos casos, pIII e pVIII são as escolhas preferidas para exibição de fagos M13.

• pVIII-Fusion display: As the major capsid with 2700 copies per phage, pVIII envelops the viral particle as spiky protrusions. As perfusões n-terminais para pVIII permitem a visualização de alta densidade de peptídeos curtos com menos de 9 aminoácidos, porque grandes inserções podem interromper o conjunto de fagias. O display pVIII é recomendado quando são necessárias cópias massivas, tais como avaliação de avidez, interações proteína-proteína e testes imunológicos.
• display de fusão pIII: localizado numa extremidade do virião com 4-5 cópias, pIII está envolvido no processo de ligação do hospedeiro durante a infecção. pIII pode suportar grandes peptídeos e proteinas, mas geralmente com baixa taxa de expressão. Portanto, o uso do display pIII é mais apropriado para a seleção de alta afinidade durante o processo de panning. Grandes bibliotecas nativas de anticorpos apresentadas em pIII foram provadas como uma abordagem poderosa para gerar candidatos de anticorpos altamente específicos e de afinidade visando uma variedade de antígenos.
• Outros vectores de visualização: excepto para pVIII e pIII, outros capsídeos também podem ser explorados como alternativa. Minor capsid pVI is able to exhibit fusion proteins at its c-terminus which makes it amenable for display cDNA libraries. pXI e pVII também emergem como veículos promissores para a sua independência de sequência de sinal, Alta taxa de recuperação, bem como alta eficiência de seleção, sugerindo um grande potencial para exibição de local duplo.

com anos de devoção e acumulação neste campo particular, a Creative Biolabs tem vindo a desenvolver e melhorar constantemente tecnologias de visualização de FAG de ponta, ao mesmo tempo que fornece suporte técnico de alta qualidade aos nossos clientes em todo o mundo. Com base em nossas plataformas de patentes e protocolos precisos, pesquisadores em Biolabs criativos construíram com sucesso bibliotecas de exibição de fagos impecáveis de diversos tipos (incluindo anticorpos, peptídeo, cDNA, andaime proteico, etc.) e clones específicos isolados com propriedades adequadas. Temos o prazer de oferecer esses serviços integrados de bibliotecas de exibição de fagos M13, bem como dezenas de bibliotecas de anticorpos pré -ade para melhor facilitar os projetos de pesquisa de nossos clientes.

Fig. 1. O ciclo de vida dos fagos filamentosos. (Huang, Bispo-Hurley e Cooper 2012)

Referência

1. Huang, J. X., Bispo-Hurley, S. L. Cooper, M. A. (2012) “Desenvolvimento de anti-infecciosos usando phage display: agentes biológicos contra bactérias, vírus e parasitas’, agentes Antimicrobianos e quimioterapia, 56(9), 4569-4582.

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