Electroforeza în Gel de agaroză a ARN

rezumat

electroforeza în Gel este una dintre cele mai importante tehnici disponibile în prezent pentru fracționarea ARN. Procedura experimentală este relativ simplă, dar totuși obține rezultate foarte reproductibile și rezoluție înaltă. ARN este un polianion și, prin urmare, va migra spre electrodul pozitiv într-un câmp electric. Dacă migrarea are loc printr-o matrice de gel cu dimensiunea porilor atent aleasă, mobilitatea moleculelor de ARN este legată de logaritmul greutăților moleculare: cele mai mici molecule care se deplasează la cea mai mare distanță. Matricile de gel adecvate pentru electroforeza ARN sunt poliacrilamida sau agaroza sub formă de tije sau plăci. Agaroza este în general preferată acrilamidei datorită ușurinței sale de manipulare și toxicității mai scăzute, deși acrilamida oferă o rezoluție mai bună a ARN cu greutate moleculară mică. Plăcile au o serie de avantaje față de gelurile cu tije: acestea permit fracționarea multor probe în condiții identice, pot fi ușor colorate și fotografiate, iar în urma electroforezei acizii nucleici pot fi transferați pe hârtie de azotat de celuloză (Northern blotting) pentru experimente de hibridizare printr-o procedură similară cu cea descrisă în Capitolul 5 (1).

You might also like

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.