を用いた細胞増殖の評価のためのalamarBlue assayこれにより、比色（吸光度）および蛍光変化が生じる。 Resorufinが赤く、非常に蛍光である一方Resazurinは青および非蛍光です。 それは敏感な試金です100つのµ lごとの5×103細胞より高くを、比較的無毒使用し、注意深く遂行されれば、同じ複製は複数の時点に続くことができます。 この試金の不利な点は蛍光性か吸光度信号が細胞数および細胞の新陳代謝の変更両方によって影響されることができるのでheamocytometryのような直接細胞
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- 96 ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏ ｆ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ ＥＣＡＣＣによって供給された、初期継代ヒト骨芽細胞（Ｈｏｂ４ ０ ６−０ ５ａ）を、試料当たり１ ０ ４の密度で基質Ａおよびｂに播種した。 試料をそれぞれ、２ ４ウェルプレートのウェルに入れ、１ｍｌの培養培地で覆い、合計１ ７日間インキュベートした。 培養培地は、１ ０％熱不活性化血清、１％グルタミンおよびビタミンＣ（３ ０μ ｇ／ｍｌ）を含有するＭｃｃｏｙ’Ｓ５Ａ培地であった。
細胞増殖を測定するために、播種した基質を10vol%alamarBlue®を補充した新鮮な培地で4時間インキュベートした（より長いインキュベーション時間を使用して高感度にすることができる）。 各基質に合計10回の複製を使用した。
インキュベーション後、各ウェルから100μ lの培地を96ウェルの黒色ポリスチレンマイクロプレートに移し、3回複製した。 蛍光（励起５ ３ ０ｎｍ、発光５ ９ ０ｎｍ）を、ＢＭＧ ＬＡＢＴＥＣＨ ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒで測定した。 （注：比色検出は、参照波長として600nmを使用しながら、570nmの吸光度測定によって監視することができます。 しかしながら、ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）の酸化形態と還元形態のかなりの重複が吸光度によって測定された場合に存在するので、感度が低下する傾向がある）。＜4195＞＜3687＞＜1384＞蛍光発光強度単位で表した細胞によるalamarBlue®還元を日数で測定した1, 3, 6, 8, 10, 13, 15 そして異なったサンプルのための文化期間の17。 各症例に対するＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）の減少率は、式＜４ １ ９ ５＞を用いて計算した。