Servicio de Construcción de Biblioteca de Fagos M13

Como precursor indiscutible e innovador explorador en el campo de la ingeniería y fabricación de anticuerpos, Creative Biolabs ha establecido una gama completa de servicios profesionales basados en nuestras exclusivas tecnologías de visualización de fagos. Entre ellos, Creative Biolabs se enorgullece de nuestro excelente servicio de construcción de bibliotecas de fagos M13, que puede generar bibliotecas de alta calidad para nuestros clientes en todo el mundo.

Nacido en 1985, phage display es un método rápido, confiable y conveniente para construir grandes bibliotecas de péptidos y ofrece un enfoque sencillo para aislar y propagar clones únicos con las propiedades deseadas a través de biopaneado de alta eficiencia. Esta tecnología contribuye a diversas aplicaciones de investigación, médicas e industriales, como el descubrimiento y la ingeniería de anticuerpos, el mapeo de epítopos, el desarrollo de medicamentos, el diseño de vacunas, etc. En contraste con el método de hibridoma convencional, la visualización de fagos ha demostrado su atractivo excepcional en el campo del descubrimiento de anticuerpos monoclonales, debido a las propiedades de fácil manejo, alta eficiencia, diversas opciones de animales huéspedes e independencia de inmunogenicidad.

Entre muchos vehículos de fagos actualmente en aplicación, el fago filamentoso M13 siempre ha sido la opción más popular y ampliamente utilizado en varios tipos de investigación. M13 es un bacteriófago de plantilla de E. coli con una apariencia típica de varilla larga que contiene un genoma de ADN de una sola hebra (6407 bp). La cubierta viral está compuesta por cinco proteínas de cápside diferentes, la cápside mayor pVIII (2700 copias) y cuatro cápsidas menores (pIII y pVI en un extremo, mientras que pVII y pIX en el otro extremo). A diferencia de T4 y T7, M13 es un fago lisogénico que se ensambla en el periplasma y se secreta fuera de la membrana bacteriana sin causar lisis del huésped.

Las múltiples proteínas de la cápside del M13 proporcionan opciones de visualización completas que se pueden emplear para mostrar una variedad de péptidos y proteínas con características distintivas. Los cinco cápsidos han exhibido con éxito bibliotecas de dominios extranjeros, cada una de las cuales crea un vector único para diferentes características. Sin embargo, en la mayoría de los casos, pIII y pVIII son las opciones preferidas para la visualización de fagos M13.

• Pantalla de fusión de pVIII: Como la cápside principal con 2700 copias por fago, el pVIII envuelve la partícula viral como protuberancias puntiagudas. Las fusiones N-terminales a pVIII permiten la visualización de alta densidad de péptidos cortos de menos de 9 aminoácidos porque las inserciones grandes pueden interrumpir el ensamblaje de fagos. La visualización de pVIII se recomienda cuando se requieren copias masivas de visualización, como la evaluación de avidez, las interacciones proteína-proteína y los ensayos inmunológicos.
• Pantalla de fusión pIII: Ubicada en un extremo del virión con 4-5 copias, pIII participa en el proceso de unión al huésped durante la infección. pIII puede soportar inserciones grandes de péptidos y proteínas, pero generalmente con baja tasa de expresión. Por lo tanto, el uso de la pantalla pIII es más apropiado para la selección de alta afinidad durante el proceso de panorámica. Las grandes bibliotecas de anticuerpos nativos presentadas en pIII se han demostrado como un enfoque poderoso para generar candidatos de anticuerpos altamente específicos y de afinidad dirigidos a una variedad de antígenos.
• Otros vectores de visualización: A excepción de pVIII y pIII, otros cápsidos también se pueden explotar como alternativa. El pVI de la cápside menor es capaz de exhibir proteínas de fusión en su terminal C, lo que lo hace susceptible de mostrar bibliotecas de ADNc. pXI y pVII también emergen como vehículos prometedores por su independencia de secuencia de señales, alta tasa de recuperación y alta eficiencia de selección, lo que sugiere un gran potencial para la visualización en doble sitio.

Con años de dedicación y acumulación en este campo en particular, Creative Biolabs ha estado desarrollando y mejorando constantemente tecnologías de visualización de fagos de vanguardia al tiempo que proporciona soporte técnico de alta calidad a nuestros clientes en todo el mundo. Sobre la base de nuestras plataformas de patentes y protocolos precisos, los investigadores de Biolab Creativos han construido con éxito bibliotecas de visualización de fagos impecables de diversos tipos (incluidos anticuerpos, péptidos, ADNc, andamios de proteínas, etc.).) y clones aislados específicos con propiedades adecuadas. Nos complace ofrecer estos servicios integrados de bibliotecas de visualización de fagos M13, así como docenas de bibliotecas de anticuerpos prefabricadas para facilitar mejor los proyectos de investigación de nuestros clientes.

Fig 1. El ciclo de vida de los fagos filamentosos. (Huang, Bishop-Hurley y Cooper, 2012)

Referencia

1. Huang, J. X., Bishop-Hurley, S.L. y Cooper, M. A.(2012) «Desarrollo de antiinfecciosos mediante visualización de fagos: agentes biológicos contra bacterias, virus y parásitos», agentes antimicrobianos y quimioterapia, 56 (9), 4569-4582.

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